4:Western Blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很浓怎么办? 对ECL发光来说,可以减少发光时间和显影时间。对英格恩Enlight发光液来说,可以将压过的膜重新用TBST洗涤10min×3次后重新曝光操作。 5:Western blot化学发光(ECL)时,胶片上条带很弱怎么办? 对ECL发光来说,可适当延长曝光时间。如果还是不行,增加蛋白的上样 …
阅读更多 »慢病毒感染与PD-1和嵌合抗原受体修饰的T细胞抗肿瘤功能研究
嵌合抗原受体修饰的T(CAR-T)细胞对血液恶性肿瘤具有很强的抗肿瘤活性。然而,将这一成功转化为实体瘤仍然令人沮丧。在实体瘤的治疗中,CAR-T治疗面临着免疫抑制环境等巨大困难。在抑制环境的建立中,程序性死亡因子-1(pd-1)/程序性死亡因子配体1(pd-l1)轴被认为起关键作用。现分享一篇慢病毒感染(envirus)与PD-1和嵌合抗原受体 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究
脂肪酸氧化(FAO)是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而,脂肪酸氧化(FAO)在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染(Entranster)与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »分步转染,先电转GFP-mRNA,表达很好,然后第二天电转了一个红色荧光DNA质粒,第三天观察的时候只看到了少数细胞有红色荧光,看不到绿色荧光了,这是怎么回事呀?按说GFP已经表达了,怎么还能消失了呢
根据你的描述,GFP在第一天有很好的表达,但在第二天转染DNA质粒后,第三天绿色荧光消失,只有少数细胞有红色荧光。这可能涉及到几个不同的因素: 1. DNA质粒表达对GFP表达的抑制 高浓度DNA引起的翻译抑制:你已经电转过mRNA,然后再转DNA质粒,这可能引发细胞对大分子DNA的免疫反应,比如激活干扰素反应。这可能抑制了翻译,不仅影响红色荧光蛋白(DNA …
阅读更多 »体内转染(entranster)与microRNA-146a保护小鼠免受手术创伤引起的认知功能下降研究
术后认知功能障碍(POCD)是一种常见的,发病率和死亡率增加的术后并发症。然而,这种并发症的神经病变发生机制至今仍不清楚。神经炎症,特别是海马体炎症,会导致POCD。最近,越来越多的证据支持micrornas(micrornas)参与调节人类神经系统疾病中的神经炎症。 现分享一篇体内转染(entranster)与microRNA-146a保护小鼠免受手术创伤 …
阅读更多 »动物体内转染后,遗传性转能维持多久?
体内转试剂Entranster转染动物时是属于瞬时的转染,对目标基因的改变,一般注射1次,可以维持7天左右。随后,随着转入的核酸的代谢,效应减弱消失。动物是否回复到原有的生理状态,这与目标基因有关系。如果希望长期维持动物的转染状态,可以多次注射。
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究
近年来,对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用,如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而,对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染试剂(Entranster)与利拉鲁肽和 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与STAT3调控的分子机制研究
信号传导子及转录激活子3(STAT3)是一个介导的各种细胞和生物过程的关键的转录因子,如细胞生长、细胞凋亡、免疫反应和肿瘤。然而,STAT3调控的分子机制仍知之甚少。现分享一篇运用DNA转染(Entranster)与STAT3调控的分子机制研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染注意事项
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »体内转染siRNA (Entranster)的方法研究肺微血管内皮功能
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输,其在血管内皮(VE)-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知,血管内皮(VE)-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件,可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA (Entranster-in vivo)的方法研究肺微血管内皮功能的文献,以供参考。
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