siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)mirRNA-423-5p与肾小管上皮细胞凋亡研究
肾小管上皮细胞(RPTECs)占到肾脏体积的90%,是构成整个肾小管间质的主要细胞类型。这些细胞对于肾功能至关重要,RPTECs的任何损伤都会使肌纤维母细胞的积累,进而导致肾小管间质纤维化。据报道,microRNAs(miRs)可以调节肾脏对于急性损伤的反应,有些mirRNA被认为在肾功能的维护和肾损伤的发展过程中起重要作用。现分享一篇体内转染( …
阅读更多 »如何通过电穿孔转染DNA?
试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水) 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶(75cm2) 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天,通过胰酶消化释放贴 …
阅读更多 »体内转染(engreen)与miR-943-3p和过敏性哮喘研究
哮喘是一种和呼吸相关症状有关的慢性气道疾病,如呼气气流受限;预计到2025年,影响哮喘患者总数将达到4亿以上。尽管所有年龄组的哮喘发病率都很高,但老年患者表现出更严重的症状。到目前为止,包括遗传学和环境因素在内的几个因素都参与了哮喘的进展,但哮喘的发病机制在很大程度上还不清楚。过敏性炎症和气道重塑是哮喘的两个基本特征。炎症细胞(主要包括嗜酸性粒 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究
羟基氯喹(Hydroxychloroquine,HCQ),氯喹的羟基化类似物,是一种抗疟原虫溶酶体抑制剂,它抑制溶酶体酸化引起的自噬,并随后阻断自噬体与溶酶体的融合,从而导致自噬体的积累,从而加速肿瘤细胞的死亡。现分享一篇ECL发光液(enlight)与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »293T分别包装两种病毒,浓缩后混合感染鼠CD8+ T细胞可以吗?
原则上可以,具体要看以下几个条件: 步骤可行性: 分别包装:在293T细胞中分别转染两种构建(比如psPAX2 + pMD2.G + 各自的载体),收集病毒上清; 浓缩:超速离心或PEG浓缩,两种病毒分别处理; 混合感染:感染前混合两种浓缩后的病毒,用于感染小鼠CD8+ T细胞。 技术要点: T细胞激活:CD8+ T细胞对逆转录病毒天然不易感染,通常需要先用 …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 中国医科大学报道:谁在保护我们的脊椎神经?
该团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了题为“MiR-128-3p Alleviates Spinal Cord Ischemia/Reperfusion Injury Associated Neuroinflammation and Cellular Apoptosis via SP1 Suppression …
阅读更多 »CircRNA AIDA通过结合miR-29a调节牛成肌细胞的发育
英文标题:*CircRNA AIDA Regulates Bovine Myoblast Development by Binding miR-29a* 期刊/年份:Cells (2026),出版信息:2026年2月24日在线发表,DOI: 10.3390/cells15050391 研究对象:牛成肌细胞 (Bovine Myoblasts) 研究概要 本研 …
阅读更多 »CCK8实验中,细胞已经死亡,但是脱氢酶的活性还在,是否能计算细胞数量?
不能。由于CCK8是通过和细胞内的脱氢酶进行反应间接反映活细胞数量,如果细胞已经死亡,但脱氢酶的活性还在,则试剂测定的细胞数量将会比真实值高,不能真实反映活细胞数量,建议采用别的方法测定。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/ …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究
MirRNAs不仅参与肿瘤的形成,也与肿瘤的分化和侵袭过程有关。然而,目前检测miRNA表达的方法有很大的缺点,如侵入性和不可再生性。上皮间质转化(EMT)在肿瘤转移和耐药方面具有重要作用。现分享一篇体内转染(Entranster)与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究的文献,以供参考。
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