2026年 5 月 2日, 星期六
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英格恩技术资料

细胞RNA转染实验的一些建议

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …

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RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤研究

        多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BC …

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siRNA转染效率不理想的原因有哪些?

siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …

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分步转染,先电转GFP-mRNA,表达很好,然后第二天电转了一个红色荧光DNA质粒,第三天观察的时候只看到了少数细胞有红色荧光,看不到绿色荧光了,这是怎么回事呀?按说GFP已经表达了,怎么还能消失了呢

根据你的描述,GFP在第一天有很好的表达,但在第二天转染DNA质粒后,第三天绿色荧光消失,只有少数细胞有红色荧光。这可能涉及到几个不同的因素: 1. DNA质粒表达对GFP表达的抑制 高浓度DNA引起的翻译抑制:你已经电转过mRNA,然后再转DNA质粒,这可能引发细胞对大分子DNA的免疫反应,比如激活干扰素反应。这可能抑制了翻译,不仅影响红色荧光蛋白(DNA …

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ECL发光液与人结肠癌细胞程序性坏死诱导剂研究

      由于细胞通过不同的凋亡方式进行程序性死亡,抗凋亡剂的癌细胞可能会对程序性坏死的诱导剂敏感。许多传统的被批准进入市场或者临床试验的化疗或分子靶向药物被确定为某些癌细胞的程序性坏死的诱导剂。这些药物包括紫草素及其类似物,β-拉帕醌和eupomatenoid-5等。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与黍稷中 …

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siRNA转染后目标基因不降反升的原因

一、生物学与分子机制相关原因 1️⃣ 负反馈调控 (feedback regulation) 某些基因被抑制后,会触发细胞的代偿机制。 例如,目标基因下调后,上游转录因子或信号通路被激活,从而 反向上调目标基因 的转录。 特别常见于信号通路核心分子(如 MAPK、PI3K、NF-κB、p53 等)的 knockdown 实验。 建 …

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CCK8实验中,做加药实验时,药物对测定是否有影响?

       有时会有影响。如果药物具有还原性,会和CCK8发生显色反应,增加吸光度。解决办法:首先要确认药物是否有吸收,在含有药物的培养基中加入CCK8,测定450 nm 的吸光度,如果它的吸光度比不含药物的培养基 (加CCK8)的吸光度高,则证明药物有影响,可在加CCK8之前更换培养基,去掉药物的影响。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击http …

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体内转染(Entranster)与SIRT3基因和非酒精性脂肪肝病研究

       作为一种正在全世界蔓延的慢性复杂性疾病,非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病率在全球范围内的攀升迅速,被称为“下一场即将到来的世界性疾病大流行”。NAFLD有发展为肝硬化甚至肝癌的风险,对人类健康造成严重威胁。 Sirtuins是一类NAD+依赖的去乙酰化酶。SIRT3是该家族 …

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ECL发光液与老年大鼠心脏功能与抗氧化防御机制关系研究

       衰老在心血管系统中表现出深刻的结构和生理变化。氧化应激是衰老过程中的一个重要因素,它与各种年龄相关的心血管疾病有关。然而,老化心脏中氧化应激的潜在机制仍不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与老年大鼠心脏功能与抗氧化防御机制关系研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sci-hub.shop/10.1016/j.bbrc.2 …

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