英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
条带弱的原因可能有以下几个方面： ①. 因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量，也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度更高的发光底物来调整，如英格恩的Enlight-plus。 ②. 蛋白没有充分转移到膜上。转膜后可通过预染Marker判断转膜效率，也可用丽春红染膜、用考马斯亮蓝染胶，判断转膜效率。 ③. 抗体效价 …
阅读更多 »Hela细胞转染后几小时内死亡是什么原因？
可能有多种原因： 目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡； 转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害； 细胞贴壁转染之后没有正常换液。 建议： 考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统； 摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试Entranster转染试剂。 对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考 …
阅读更多 »电转染试剂（Entranster-E）转染Huh7细胞效果图
B27添加剂（engreen）培养大鼠皮层细胞效果图
B27添加剂（engreen）培养大鼠海马神经元细胞效果图
PCR试剂效果图
如图所示，engreen的PCR试剂跑出来的条带清晰，准确，无非特异性扩增条带，是理想的PCR试剂。
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »超敏型ECL发光液-Enlight-plus
产品介绍 用于辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白或核酸检测。 超300家实验室应用3年，从未想过更换！ 主要特点 Pg级别 EnlightTM-Plus含高灵敏的发光增强剂，检测级别可以达到pg级。 低背景 EnlightTM-Plus采用精准的发光底物，有效降低发光试剂造成的非特异发光和背景发光。 时间长 EnlightTM-Plus采用特异的发 …
阅读更多 »增强型ECL发光液-Enlight
产品介绍 用于辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白或核酸检测。 超300家实验室应用3年，从未想过更换！ 主要特点 超灵敏 EnlightTM含独特的发光增强剂，发光灵敏度非常高。 超稳定EnlightTM含独特的发光稳定剂，4℃储存1年以上，信号强度不变。 低背景EnlightTM含精准的发光底物，提高信噪比110倍以上，灵敏度更高背景却更低。 信号强Enl …
阅读更多 »流式检测细胞周期操作步骤
细胞培养： 取对数生长期的细胞，按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内，进行所需的处理（比如加入药物），特定时间后终止培养，进行下一步的实验。 细胞固定： 800rpm离心5min，收集细胞沉淀，弃上清，用预冷PBS洗涤两次，加入预冷75%乙醇，于4℃固定4h以上。 3. 细胞染色： 1500rpm离心5min，弃上清，以3 …
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