英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
宿主细胞的模式识别受体可以检测到微生物感染进而诱导先天免疫反应以激活宿主防御系统对抗入侵微生物，现分享一篇DNA转染（Entranster-H4000）与线粒体介导的先天性免疫反应研究的文献，指出果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）是抗病毒天然免疫反应的负调节因子和抗病毒药物的新靶点。
阅读更多 »体内转染let-7d（Entranster）与肾细胞癌治疗研究
肾细胞癌(RCC)是成年人肾脏最常见的恶性肿瘤，占肾脏恶性肿瘤的90％以上，恶性程度高。其发病率约为成年人恶性肿瘤的3％,。肾细胞癌预后很差，对放疗、化疗均不敏感。目前，局部肾细胞癌的治疗取得了很大的进展，但是对于转移性肾细胞癌治疗的选择非常有限。因此，鉴定新的肾细胞癌生物标志物以及具有更好疗效的抗肿瘤药物仍亟待解决。mirRNA是内源性的非编 …
阅读更多 »shRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下shRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应，这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA，通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚，并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染（Entranster）与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与缺氧诱导因子和肾再生研究
虽然哺乳动物的肾再生发生在在整个生命期中，但哺乳动物的成熟的肾脏并不能充分再生，尤其是肾小球。以往的研究表明，肾部分切除术后的脱细胞肾支架可增强肾的再生。现分享一篇体内转染（Entranster）与缺氧诱导因子和肾再生研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与中性粒细胞气道炎症研究
吸入糖皮质激素，主要是皮质类固醇，目前治疗哮喘最有效的方法。然而，这种疗法去无法阻止重症哮喘或者顽固性哮喘的发展，被称作是非嗜酸细胞性哮喘（NEA）。NEA的特点是中性粒细胞（PMN）数目增加，并伴有单核细胞/巨噬细胞、肥大细胞和淋巴细胞相关的炎症反应。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与中性粒细胞气道炎症研究的文献，以 …
阅读更多 »细胞RNA转染的几点建议
为了做好RNA转染实验，提出几点关于细胞RNA转染实验的建议，供大家参考： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »如何应对悬浮细胞转染难题？
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞 …
阅读更多 »体内转染siRNA（engreen）与衰老相关的神经炎症研究
作为衰老过程中的主要特征，神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制，包括阿尔茨海默氏病（AD）。触发受体表达髓系细胞（TREM）2是一种新的AD致病基因，但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA（Entranster-in vivo）敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献 …
阅读更多 »如何做好siRNA转染实验？
为了做好siRNA转染实验，在转染过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导 …
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