英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
已有众多的文献报道，脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC（蛋白激酶C）通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30)；如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):362-8)；如与线粒体膜发生作用(J Biol Chem. 19 …
阅读更多 »western-blot化学发光（ECL）时，胶片上条带很浓怎么办？
可通过以下几个方面进行改进： 1. 可减少蛋白上样量； 2. 降低一抗二抗稀释度，减少抗体孵育时间； 3. 如果背景深的话，则要把发光液沥干些再压片；如果背景不深则需减少发光时间和显影时间。 4.选择合适的发光液，比如Enlight。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与CREB1基因沉默对血管性痴呆小鼠认知功能障碍的影响研究
血管性痴呆（VD）是老年痴呆的第二大病因，仅次于阿尔茨海默病（AD），在西方国家占所有痴呆病例的17.6%，研究表明在世界东部地区，包括中国和日本人口中，认知功能障碍的人数要更多。认知功能障碍广泛被认为是痴呆患者的经典特征。VD，以各种脑血管疾病为特征的损伤综合征主要与缺血性脑血管疾病相关。目前，VD的确切发病机制仍不清楚。因此，有必要更详细地阐明该病症背后 …
阅读更多 »细胞转染效率低是什么原因？
转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质粒DN …
阅读更多 »siRNA细胞转染过程中应注意事项
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染操作步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与谷胱甘肽过氧化物酶4抗炎作用研究
抗氧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4），可通过消除花生四烯酸（AA）代谢网络产生的氧化物质来解决炎症问题。上调其活性已被认为是一种有前途的炎症干预策略。现分享一篇DNA转染（Entranster）与谷胱甘肽过氧化物酶4抗炎作用研究的文献，旨在研究GPX4激活剂对AA代谢网络和炎症相关通路的影响。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与P2Y12 shRNA减轻2型糖尿病大鼠神经病理性疼痛研究
糖尿病性神经病理性疼痛是2型糖尿病（DM）的常见并发症。背根神经节（DRG）中星形胶质细胞（SGCs）的激活通过释放促炎细胞因子在神经病理性疼痛中发挥重要作用。P2Y12受体在DRG的SGCS中表达。现分享一篇体内转染（Entranster）与P2Y12 shRNA减轻2型糖尿病大鼠神经病理性疼痛研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究
新型锌指蛋白121（ZNF121）已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联，以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用，现分享一篇DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与睾丸生殖细胞肿瘤研究
睾丸生殖细胞瘤(Testic..cell tumors,TGCTs)是青少年和青年男性最常见的实体瘤之一,约占2012年全世界20～39岁男性肿瘤的8.9%。肿瘤生长受癌细胞与肿瘤微环境的串扰调制。最近的进展表明，肿瘤细胞中的miRNA功能障碍可以调节肿瘤微环境以间接决定其进展。然而，这一过程在睾丸生殖细胞肿瘤（TGCTs）中知之甚少。现分享一篇RNA转染（ …
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