1980年底Gordon等人首次将克隆的基因注入小鼠受精卵原核,然后移植于假孕的母鼠输卵管,培育出第1个转基因动物。这种将外源性基因用实验方法插入动物生殖细胞的基因组而获得具有插入基因特性,并能正常繁衍的动物称为转基因动物 ( transgenicanimals)。转基因技术是生物学领域最新重大进展之一,已能渗透到生物学、医学、畜牧学等学科的广泛领域。转基因 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之一——实验动物的抓取和固定
在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物,使动物少受痛苦。 一、小鼠 小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手 …
阅读更多 »哪种RNA转染试剂效果更好? Turbofect or EntransterTM-R4000?
近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofect transfection reagent(Thermo)和 EntransterTM-R4000(Engreen)进行了一次RNA转染比较。比较情况如下: 实验方法 转染试剂:Turbofect transfection reagent(Thermo)和 EntransterTM-R4 …
阅读更多 »小鼠尾静脉注射技巧有哪些?
1.小鼠的固定 最好使用小鼠固定器,前部有气孔保证小鼠呼吸,后部可以将尾部拉出,不要让小鼠在固定器中有太多活动空间, 如空间较大,可加入一些填充物,防止小鼠在注射时乱动。 2.尾静脉的准备 可以将小鼠尾部在50℃左右温水浸浴2分钟,以扩张静脉。 3.尾静脉的选择 小鼠尾部有3条尾静脉。背部1天,两侧各1条。由于背部静脉较深,较细,一般选择侧面的2条。 4.注 …
阅读更多 »Neuropharmacology | 治疗阿尔兹海默症的新视角
近日,中国药科大学姚文兵教授课题组在《Neuropharmacology》期刊上发表了“MicroRNA-23b attenuates tau pathology andinhibits oxidative stress by targeting GnT-III in Alzheimer’s disease”的研究论文,揭示了MicroRNA-2 …
阅读更多 »细胞转染为什么不能加血清?
看过很多细胞转染的高手,在做真核细胞转染时,都是在把核酸和转染试剂的混合液加入细胞表面以前,将融合的细胞的含血清的培养液弃去,用无血清培养基清晰后再加入混合物,4-6h后再换含血清的培养基。这是为什么呢?为什么这些转染试剂要求不含血清呢? 传统的转染试剂有一定的细胞毒性,在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如,阳离子脂质体。带正电的脂 …
阅读更多 »磷酸钙-DNA共沉淀法的原理和步骤
前些时间有微友在平台上咨询细胞转染的事项,并对一篇博客文章《为什么磷酸钙转染并不稳定?为什么磷酸钙转染并不经济?》比较感兴趣。在这里,对这位微友的疑惑进行更加全方位的了解,在此将磷酸钙转染的原理和步骤和大家分享,以供交流讨论。 核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时,可使 DNA 附在细胞表面,这有利于细胞吞入摄取核酸,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进 …
阅读更多 »病毒转染原理及步骤
病毒转染原理及步骤 在细胞相关的实验操作中,对于一些按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞,通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率,以达到目的基因的高效瞬时表达。 病毒转染包括以下步骤:1构建载体 2包装提纯病毒 3感染靶细胞。以慢病毒为例。 慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起 …
阅读更多 »Theranostics | 关于1型糖尿病的新发现
复旦大学儿童医院儿科研究所的团队在《Theranostics》上发表了题为“Circular RNA circPPM1F modulates M1 macrophage activation and pancreatic islet inflammation in type 1 diabetesmellitus”的论文。文章阐明了 …
阅读更多 »Experimental immunology | 是什么在助长红斑狼疮?
中国西安交通大学医学院在最新的研究中首次表明:lncRNA MIAT 通过体内降解miR-222来上调 CFHR5 表达,增强狼疮疾病的活动,并在《Experimental immunology》期刊上发表了题为 “LncRNA MIAT enhances systemic lupus erythematosus by upregulating …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享