英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

缝隙连接蛋白（Cx）构成脊椎动物的缝隙连接（GJ），可调节重要的细胞过程，包括电耦合，增殖，分化和凋亡。与最初在上世纪60年代提出的“接触增长抑制”概念一致，GJ和CX被公认为肿瘤抑制；恶性肿瘤的特点是GJ的缺失。在恶性肿瘤细胞中，转染Cx以GJ依赖的方式提高放疗/化疗诱导的细胞凋亡（有毒的“旁观者效应”）。Cx在宫颈癌中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染 …

1.        不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2.        细胞选择错误 用 …

Western，也称Western blot、Western blotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。可按照以下步骤操作。 1.收集蛋白样品(Protein sample preparation) 使用细胞裂解液，对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解。然后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。 2. 电泳(Electrophoresis …

细胞转染是细胞生物学和分子生物学的一种常用的技术手段。而转染效率低下却是实验人员经常遇到的问题，尤其是原代细胞转染，转染难度更大。现分享几个细胞转染实验常见的几个陷阱，望实验人员能够注意。 1.准备不足 做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细 …