进行2个不同基因的siRNA共转染时，确实可能需要调整核酸或者转染试剂的剂量，但和质粒共转染的情况有一些区别。 转染试剂的剂量： 当你进行siRNA共转染时，转染试剂的剂量通常依赖于转染效率。对于siRNA来说，一般情况下转染试剂的量不需要比单一siRNA转染时增加太多，因为转染试剂的作用主要是包裹和传递siRNA到细胞内，只要达到足够的转染效率就可以。如果 …
阅读更多 »转染siRNA后，通常是会影响细胞的基因表达，但是否可以重新铺板要考虑几个因素。一般情况下，如果转染后需要重新铺板，建议采取以下步骤： 转染后的时间点：siRNA的效果一般需要在转染后24-48小时才能显现，因此在这个时间段内，你不应该轻易处理细胞。若重新铺板，需要确保转染后的时间足够，能让siRNA充分发挥作用。 细胞状态：如果在转染后细胞健康状况良好，并 …
阅读更多 »共转染实验中，判断质粒的表达能力通常有几种常见的方式，具体方法取决于你的实验设计和质粒中所包含的标记。以下是几种常用的检测方式： 1. 荧光标记 如果质粒中包含了荧光标记基因（如GFP、RFP等），通过显微镜直接观察荧光信号是最直观的方式。这种方法不仅可以评估质粒的转染效率，还可以间接反映出质粒的表达能力。 优势：快速、简便，能够同时评估转染效率和蛋白表达。 …
阅读更多 »如果细胞密度较低，一般来说，细胞在转染前的培养时间是很关键的。48小时的培养时间通常是足够的，但是否适合转染还要考虑几个因素： 1. 细胞的生长状态 细胞在转染时最好处于对数生长期，也就是细胞在活跃分裂和增殖中。若细胞密度过低，可能会处于生长迟缓或衰退状态，这会影响转染效率。 细胞密度太低（<30%）：如果细胞太少，可能会影响转染试剂的吸附和细胞的转染 …
阅读更多 »
英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
