英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
人体肝脏承担着多种任务，包括解毒，代谢废物的排出、营养摄取和储存、总能量代谢和重要血清蛋白的分泌。其特殊功能使肝脏成为一个极易受到毒性损伤的器官，可能引发肝脏炎症和随后的纤维化和终末期组织损伤。在所有肝毒性化学损伤中，对乙酰氨基酚（APAP）过量被认为是西方国家急性肝衰竭的最常见原因。虽有报道称，美国50%以上的急性肝衰竭病例都与APAP中毒有关 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与细胞自噬和大鼠缺血性损伤研究
卒中尤其是缺血性卒中，可能导致严重的神经功能障碍，甚至死亡，在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡，并且在脑缺血中，自噬作用在累积。自噬作用是复杂的，取决于大脑的成熟度，区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in viv …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与玉米黄矮病毒RMV2编码的RNA沉默抑制物鉴定研究
玉米黄矮病毒RMV2（MYDV-RMV2）导致中国安徽省田间玉米植株的矮化和泛黄症状。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与玉米黄矮病毒RMV2编码的RNA沉默抑制物鉴定研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（entranster）与信号素3A导致创伤性脑损伤后继发性血脑屏障损伤研究
创伤性脑损伤（TBI）是一种危害人类健康的高发病率疾病，随着社会的发展，这种疾病的发病率有上升的趋势。脑外伤死亡率为10.8%，致残率为12%。脑外伤已成为40岁以下人群的第五大死因，年轻人约占脑外伤患者的70%。信号素3A（SEMA 3A）是信号素家族的成员，是一类参与神经网络构建的膜相关蛋白。SEMA3A曾被报道可影响血管通透性，但其在创伤性脑损伤（TB …
阅读更多 »shRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下shRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »体内转染与mir-301a抑制和脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用研究
脑缺血病具有发病率高、致残率高、死亡率高等特点，其主要治疗原则是恢复缺血区的血液再灌注。但一旦发生脑缺血，血液再灌注短期恢复后神经损伤会进一步加重，称为脑缺血再灌注（I/R）损伤。总的来说，脑I/R损伤的病理生理机制非常复杂，在I/R损伤过程中涉及到各种元素，如氧化应激、凋亡和炎症反应。更重要的是，炎症反应和细胞凋亡被认为是诱发脑I/R损伤的主要 …
阅读更多 »ECL发光液（Enlight）与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究
少突胶质细胞（ODNs）是中枢神经系统（CNS）的主要细胞，对神经元功能至关重要。中枢神经系统髓鞘异常是多种神经系统疾病的特征，包括白质损伤、多发性硬化和视神经脊髓炎。脱髓鞘的原因通常包括免疫损伤、兴奋毒性、病毒感染、肌营养不良和氧化应激。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »电转感受态细胞的制备
1、 -80℃冰箱保存的菌种在SOB 固体平板上划单菌落； 2、次晨，挑选单克隆感至内含1ml SOB 液体培养基的试管中，37℃，300rpm，6 hr； 3、然后转接到含400ml SOB 液体培养基的2L 摇瓶中（按1:500 的量转接），300rpm，4hr，然后每隔2 min 测一次OD ，至OD =0.76； 4、立刻置冰水浴中骤冷，可以选择在一 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与半滑舌鳎脾脏巨核细胞病毒诱导蛋白和病毒感染所必需的细胞过程
虹彩病毒科是一个双链、二十面体结构的DNA病毒科，能感染昆虫、两栖动物、鱼类和爬行动物等许多无脊椎动物和脊椎动物。目前，虹彩病毒科分为五个属，其中三个属是从水产养殖物种中分离出来的，即蛙病毒、淋巴孢子病毒和巨核细胞病毒。据了解，30多种养殖鱼类（特别是桂鱼、大黄鱼、石鲷、红海鲷、鲈鱼和胸膜吸虫）都会感染巨链病毒。巨细胞病毒感染可导致30%至100%的死亡率， …
阅读更多 »电转染实验时，siRNA有什么要求？
使用高纯度、无菌的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。建议在250-750nM最终浓度范围内的进行siRNA不同浓度的梯度实验。建议设置一个非靶向或无意义的siRNA对照序列，以验证实验siRNA的特异性。同时也验证，针对单个基因用多个siRNA序列实验产生的表型是否是由于脱靶 …
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