这是个很实际的问题。在转染实验中,荧光标记良好说明转染效率高,但如果qPCR在24小时没有观察到预期的基因敲低效果,可能存在以下几种情况: 1. 延长收样时间可能是一个方向 有些siRNA或shRNA介导的敲低效果在48小时甚至72小时后才会明显,因为: mRNA的半衰期可能较长; 敲低并不等于马上降解已有的mRNA; 目标蛋白的表达也可能滞后。 建议: 设 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究
人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的反转录激活因子(TAT)蛋白已知经历泛素化。然而,泛素化在调节TAT稳定性和活性方面的作用尚不清楚。 现分享一篇DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与Egr-1表达下调和氯胺酮抗抑郁作用研究
氯胺酮是N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA)的非竞争性拮抗剂。越来越多的证据表明,单剂量氯胺酮会产生一系列快速而显著的抗抑郁作用。然而,其机制尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与Egr-1表达下调和氯胺酮抗抑郁作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »慢病毒载体构建原理
慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成,即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白;载体成分则与包装成分互补,即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列,同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转染包装 …
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关,这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性,有丝分裂纺锤体由精细的机制组装,并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是,中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成,但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染(Entranster)与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
阅读更多 »体内转染与RIP3和大鼠实验性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究
程序性坏死是由多种蛋白介导的一种调节性坏死形式,包括肿瘤坏死因子α(TNF-α)和受体相互作用蛋白(RIPS)。TNF-α是一种重要的炎症分子,是程序性坏死通路中的起始信号,而RIP3可作为一种促使细胞程序性坏死的开关。蛛网膜下腔出血(SAH)是一种常见的出血性卒中类型,死亡率和致残率高。RIP3在许多中枢神经系统疾病中都有研究,但其在蛛网膜下 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与细胞自噬和大鼠缺血性损伤研究
卒中尤其是缺血性卒中,可能导致严重的神经功能障碍,甚至死亡,在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡,并且在脑缺血中,自噬作用在累积。自噬作用是复杂的,取决于大脑的成熟度,区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内 …
阅读更多 »ECL发光液与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中线粒体依赖性凋亡研究
据报道,早期脑损伤(EBI)是蛛网膜下腔出血(SAH)患者高死亡率和不良预后的主要原因,细胞凋亡是EBI中最重要的生理病理机制。最近,有研究发现硫氧还蛋白相互作用蛋白(txnip)将内质网应激(ER应激)与神经元凋亡联系起来,并加重EBI。然而,其他潜在的机制仍然未知。现分享一篇ECL发光液(enlight)与硫氧还蛋白相互作用蛋白和蛛网膜下腔出血后早期脑损 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与心肌缺血后背根神经节P2X4导致交感神经活动异常研究
冠状动脉阻塞继发心肌缺血(MI)是一种严重的心脏病,发病率和死亡率都很高。交感传入通路是心肌梗死信号传导的关键。背根神经节(DRG)神经元的感觉输入在控制交感神经输出到心脏的过程中起着重要作用。 心肌缺血可激活交感传入神经末梢,常伴有血压升高和交感传出兴奋,引起交感兴奋反射。冠状动脉闭塞模型还通过激活缺血左心室的感觉神经末梢来诱导交感神经反射。交感 …
阅读更多 »miRNA转染(Entranster)与白细胞介素IL-23受体和甲状腺炎研究
Hashimoto甲状腺炎(HT)是一种典型的器官特异性自身免疫性疾病,其特征是自身对甲状腺抗原的耐受性降低。白细胞介素IL-23受体(IL-23R)越来越被认为是自身免疫性疾病的一个关键点,包括Hashimoto甲状腺炎(HT)。然而,调节IL-23R表达的分子机制尚不清楚。现分享一篇miRNA转染(Entranster-R4000)与白细胞介 …
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