鼻腔肿瘤是一种罕见的恶性肿瘤,每年全球发病率约为1/10万。组织学上,鼻腔肿瘤分为肉瘤、嗅神经母细胞瘤、粘膜黑色素瘤和癌。鼻腔肿瘤中55%以上为癌,包括鳞状细胞癌(SCC)、腺癌和腺样囊性癌,倒置乳头状瘤(IP)是鼻腔和鼻窦常见的良性肿瘤。IPS的恶性转化率小于27%,但其转化过程中涉及的组织形态学、免疫组化及生物学标记尚不清楚。因此,探索ips …
阅读更多 »RNA转染与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究
近年来,对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1(GLP-1)及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用,如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而,对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞电转染实验的几点建议
1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与中性粒细胞气道炎症研究
吸入糖皮质激素,主要是皮质类固醇,目前治疗哮喘最有效的方法。然而,这种疗法去无法阻止重症哮喘或者顽固性哮喘的发展,被称作是非嗜酸细胞性哮喘(NEA)。NEA的特点是中性粒细胞(PMN)数目增加,并伴有单核细胞/巨噬细胞、肥大细胞和淋巴细胞相关的炎症反应。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与中性粒细胞气道炎症研究的文献,以 …
阅读更多 »ECL发光液与猪繁殖与呼吸综合征病毒与胆固醇-25-羟化酶研究
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种免疫调节性病原体,已被公认为调节宿主干扰素(IFN)系统。胆固醇-25-羟化酶(CH25H)是一种重要的干扰素刺激基因(ISG)编码多面体膜蛋白,显著抑制许多病毒的复制。最新研究表明,CH25H抑制PRRSV的复制,同时PRRSV的感染可显著下调CH25H的表达,但涉及CH25H下调的病毒蛋白尚不清楚。现分享一篇EC …
阅读更多 »动物实验系列篇章之六——实验动物各种体液、骨髓的采集方法
一、消化液的采集 (一) 唾液 1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。 2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用外科手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分开,穿过皮肤切口引到颊外,将带有导 …
阅读更多 »做嘌呤霉素筛选滴定时,感染两天,puro杀3天,5天细胞长得很密原因和解决方法,另外镜下数整个孔的克隆数感觉困难,能换成镜下视野面积与孔面积比换算吗?
问题1:“感染两天,puro杀3天,5天细胞都长很密” 原因: 细胞分裂快(比如 293T)→ 在5天内即使有筛选,还是会长满。 感染率高 → 很多细胞表达抗性,嘌呤霉素筛选不够“稀释” 建议: 缩短时间:感染 24h 后就加 puromycin,第 2 天开始杀,杀 2–3 天就足够。 更稀释的病毒梯度:推荐加大稀释倍数:1:1000,1:5000,甚至 …
阅读更多 »体内转染与linc-smad7促进成肌细胞分化和肌肉再生研究
骨骼肌来源于胚胎发育过程中的体细胞,这是一个高度协调的过程,涉及到成肌细胞增殖、分化的各个发育阶段,最终融合成多核肌管和肌纤维。这些发育阶段主要是由一系列肌源性调节因子(mrfs)确定,包括肌源性D、肌源性因子5(myf5)、肌生成素和mrf4,以及肌细胞增强因子2(mef2)家族。之前的研究表明,LncRNAs在表观遗传动力学和基因表达方面具有 …
阅读更多 »293T分别包装两种病毒,浓缩后混合感染鼠CD8+ T细胞可以吗?
原则上可以,具体要看以下几个条件: 步骤可行性: 分别包装:在293T细胞中分别转染两种构建(比如psPAX2 + pMD2.G + 各自的载体),收集病毒上清; 浓缩:超速离心或PEG浓缩,两种病毒分别处理; 混合感染:感染前混合两种浓缩后的病毒,用于感染小鼠CD8+ T细胞。 技术要点: T细胞激活:CD8+ T细胞对逆转录病毒天然不易感染,通常需要先用 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与镰刀菌细胞毒性研究
在自然界中,微生物镰刀菌病原体普遍侵入宿主植物、动物和人类,并且共生次生代谢物真菌毒素。除农业经济损失外,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为例,这些物质通常是对食品安全、动物和人类健康带来严重威胁。虽然全世界对食品中DON阈值的许多规定都是严格立法的,但DON对婴儿、青年和老年人群的毒性和安全限度仍存在相当大的争议,这实际上是由于对DON毒 …
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