英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与内皮素-1与肺动脉平滑肌细胞研究
肝肺综合征（HPS）是肝病晚期的严重并发症，其死亡率明显增加。循环介质介导的肺血管重构（PVR）在HPS发病机制中起重要作用，但其机制尚不明确。现分享一篇RNA转染（Entranster）与内皮素-1（ET-1）与肺动脉平滑肌细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体外转录法制备dsRNA中，怎么知道mRNA的靶区域在哪
在体外转录法制备dsRNA（双链RNA）的过程中，确定mRNA的靶区域是关键的一步。以下是一些常用的方法和步骤，以帮助确定mRNA的靶区域： 1. 目标基因的选择 首先，确定你想要抑制或研究的目标基因。你需要有这个基因的完整序列信息（通常从基因数据库中获得，如NCBI）。 2. 设计siRNA或shRNA序列 设计小干扰RNA（siRNA）或小发夹RNA（s …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与微管稳定性研究
微管介导的细胞事件如细胞内转运和细胞极性的维持高度依赖于微管的稳定性，微管稳定性由细胞中微管相关蛋白（MAPs）的集合控制。MAP7结构域蛋白3（Mdp3）近来被认为是微管稳定性的关键调节因子。然而，如何实现这一功能仍然是不清楚的。现分享一篇DNA转染（Entranster）与微 …
阅读更多 »International Immunopharmacology | 中国解放军总医院报道: 治疗肺病的新机制
该团队在《International Immunopharmacology》期刊上发表了题为“LPS-induced vein endothelial cell injury and acute lung injury have Btk and Orai 1 to regulate SOC-mediated calcium influx”的论文 …
阅读更多 »CCK8试剂盒工作原理是什么？
CCK8基于水溶性四唑盐WST8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐），WST8在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料（formazan）。甲臜染料能够溶解在组织培养基中，与活细胞数量成正比。通过比色，可以动态地量化活细胞的数量，从而对细胞增 …
阅读更多 »如何利用好慢病毒感染的原理和特点？
一、原理 慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体，与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比，一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用，另一方面，Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后，可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …
阅读更多 »动物体内转染实验时，不同组织的核酸分布情况是怎样的？
使用Entranster体内试剂转染核酸时，如果通过尾静脉注射，确实不同组织的分布有差异。一般来说，肝、肺、肾的分布最高。一般分布高的地方转染效率也相对较高。但不是其他的组织器官效果就不好，相反，对绝大多数的器官组织来说，采用体内转染技术，效果也很好。比如一般认为神经细胞难以转染，而且尾静脉动物给药，通过血 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究
流行性乙型脑炎病毒（JEV）感染是一种以神经元死亡为特征的脑组织疾病。然而，人们对其基本机制知之甚少。现分享一篇RNA转染（Entranster）与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究的文献，以供参考。
阅读更多 »Mdga2缺失导致BDNF/TrkB信号异常激活，从而引发自闭症相关的突触和行为改变
文献标题：Mdga2 deficiency leads to an aberrant activation of BDNF/TrkB signaling that underlies autism-relevant synaptic and behavioral changes in mice 期刊名称：PLOS Biology 影响因子：IF = 9.8（ …
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