一项研究提示,手语和手势可能是被人类大脑的不同神经系统处理的。尽管手语和手势都传达了符号含义,但它们被认为在根本上是有区别的。 为了比较参与处理手语和手势的神经系统,Aaron Newman及其同事在一项测试中招募了19名先天性耳聋的美国手语(ASL)母语使用者与19名有听力的非手语英语母语使用者,这项测试的目的是在受试者观看非语言手势、美国手语(ASL)关 …
阅读更多 »如何有效提高细胞转染实验效率?
1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的 …
阅读更多 »提高PCR特异性的策略
1、巣式pcr(Nest-PCR)可增加稀有靶序列的灵敏度;降低了扩增多个靶位点的可能性;提高PCR特异性 2、递减PCR(Touch Down PCR):前几个循环使用严谨的退火条件提高特异性;循环设在比估算的Tm高大约5的退火温度下开始,然后每个循环降低1-2,直到退火温度低于Tm 5 。适合用于AFLP、DNA指纹分析等。 3、热启动PCR:抑制一种基 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与AMPA受体和巨噬细胞中TNF-α的表达和释放研究
谷氨酸(Glu)是中枢神经系统中一种兴奋性神经递质,并根据其特定的谷氨酸受体发挥多种功能。谷氨酸也是一种营养氨基酸,存在于血液中。谷氨酸受体有两组,它们是离子型受体(IGLURs)和代谢型受体(MGLURs)。IGLURS是根据其对激动剂的选择性分为三个亚型:N-甲基-D-天门冬氨酸受体(NMDA),A-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸 …
阅读更多 »哪些因素会造成western-blot发光时发生荧光淬灭?
荧光淬灭是Western Blot发光时常见的现象,即加ECL发光液后立刻可以看到很明显的亮光,但亮光很快就消逝了,压完片后条带却很弱,甚至没有条带,发生这种情况的原因可能有以下几个方面: 1. 抗体浓度太高,局部过多的HRP会快速消耗底物,导致荧光信号过强,条带呈灼烧样。可降低抗体上样量。 2. 抗体浓度 …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染操作步骤
现分享一下我们实验室的悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释 …
阅读更多 »RNA转染与启动子相关的小双链RNA激活研究
最近的一些报道表明,与启动子区互补的小激活dsRNA [双链RNA;SaRNA(小激活dsRNA)]可以上调哺乳动物细胞中的基因表达,这种现象被称为RNAa(RNA激活)。然而,关于什么是启动子靶向SARNA的靶分子,以及参与该过程的蛋白质是什么等RNAa的分子机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与启动子相关的小双链RNA激活研究的文献 …
阅读更多 »细胞DNA转染效率影响因素
1, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大,又没有经验,选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率会高一些。有的转染试剂还会提供一些 …
阅读更多 »闪烁液的配制方法
做好RNA转染的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享