运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后,针对具体的组织器官,不同的注射方法会明显影响效果。比如,大脑神经细胞的体内转染,可以采用尾静脉注射和侧脑室注射,用侧脑室的方法就好得多。再比如,肺部的体内转染,用气管灌注就比用尾静脉注射的方法好得多。体内转染试剂和核酸的混合物与 …
阅读更多 »美国专家公布有关寿命的9个新发现:久坐不动最减寿
责任心强,更长寿。 一项长达8年的研究显示,各种性格特征中,责任心最有助长寿。斯坦福大学研究人员表示,做人谨慎细心、做事耐心有计划,像研究人员那样有点强迫症倾向,都有助长寿。这类人做事自觉,对待婚姻、工作、健康各方面,往往能做出正确的选择,不太会因为抽烟、飙车,不遵医嘱等原因而意外丧生。 饮食定生死。 研究人员发现,地中海饮食是有助长寿的饮食方式,即多吃果蔬 …
阅读更多 »怎样做好siRNA细胞转染?
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »siRNA转染后细胞死亡是什么原因?
siRNA转染后细胞死亡,原因也是多样的,如脂质体毒性,转染浓度过高,转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生,这种情况下就需要适当优化转染条件;可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂,如英格恩的纳米材料的Entranster试剂,另外,如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的,出现细胞死亡的现象可能正是由于基因干扰引起的,如 …
阅读更多 »细胞电转染实验注意事项
1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞的选择 用 …
阅读更多 »哪些因素会造成western-blot发光时发生荧光淬灭?
荧光淬灭是Western Blot发光时常见的现象,即加ECL发光液后立刻可以看到很明显的亮光,但亮光很快就消逝了,压完片后条带却很弱,甚至没有条带,发生这种情况的原因可能有以下几个方面: 1. 抗体浓度太高,局部过多的HRP会快速消耗底物,导致荧光信号过强,条带呈灼烧样。可降低抗体上样量。 2. 抗体浓度太低,荧光信号太弱,可能第一次压片能够获得很弱的条带 …
阅读更多 »CCK8试剂盒能否对活细胞进行染色?
不能。因为CCK8 的主要成分是一种水溶性的四唑盐 (WST8),并通过电子载体PMS 将活细胞中的电子交换到培养基中的WST8 上。由于生成的甲臜也是高度水溶性的,因此CCK8 不能对细胞进行染色。 如需了解更多关于CCK8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »提高慢病毒感染细胞效率的方法
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的EnvirusTM-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成EnvirusTM-LV稀释液。4℃静置5 …
阅读更多 »值得收藏的western-blot实验注意事项
· 滤纸、胶、膜之间的大小,一般是滤纸>=膜>=胶。 · 滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡,气泡会造成短路。 · 因为DEPF膜的疏水性,膜必须首先在甲醇中完全浸湿。而且在以后的操作中,膜也必须随时保持湿润(干膜法除外)。 · 滤纸可以重复利用,上层滤纸(靠膜)内吸附有很多转移透过的蛋白质,所以上下滤纸一定不能弄混,在不能分辨的情况下,可以将靠胶滤 …
阅读更多 »CCK8与LncRNA NR2F1‐AS1和甲状腺癌细胞的增殖、迁移和凋亡研究
甲状腺癌(TC)是全球最常见的内分泌恶性肿瘤,约占头颈部恶性肿瘤的三分之一。近几十年来,全球甲状腺癌发病率和死亡率不断上升,有大量的危险因素与TC的发生和发展密切相关,如遗传因素、环境暴露和表观遗传改变等。尽管在检测和手术管理方面有所改进,包括手术切除、放射治疗和左甲状腺素治疗,但仍有更多的最佳疗法有待进一步发展。因此,揭示TC进展的潜在机制和 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享