木材即是木本植物的次生木质部,包含木本植物光合作用产生的绝大部分生物量,是制浆造纸工业、建筑业、纺织业以及新兴的生物能源产业的重要原材料。 木材的形成主要依赖于次生木质部的年度周期性生长和累加。木材主要由纤维素、木质素和半纤维素三种成分组成,也就是我们通常所说的纤维生物质。在植物所积累的太阳能中,90%以上是以纤维生物质形式存在。因此,木材在生产应用过程中, …
阅读更多 »提高细胞转染实验效率的要点
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸,葡萄糖),维生素,无机盐,和缓冲物质。有些成分非常不稳定,因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »细胞转染的方法有哪些?
1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。脂质体法始于1987年,此法的出现使得转染效率、转染的稳定性和可重复性大大提高。阳离子脂质 …
阅读更多 »悬浮细胞为什么不容易转染?
悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周 …
阅读更多 »CCK8试剂盒能否对活细胞进行染色?
不能。因为CCK8 的主要成分是一种水溶性的四唑盐 (WST8),并通过电子载体PMS 将活细胞中的电子交换到培养基中的WST8 上。由于生成的甲臜也是高度水溶性的,因此CCK8 不能对细胞进行染色。 如需了解更多关于CCK8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »western blot常见问题分析
细胞培养之新手必看
细胞培养技术是细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究的基础实验技术之一。通过细胞培养可以直接观察活细胞的形态结构和生命活动,联合各种技术进行各种物理、化学生物的研究。 一、准备工作 细胞培养的准备工作是很重要,也很复杂的一项工作,应予以重视。 1.无菌室及无菌操作台 无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等 …
阅读更多 »贴还是不贴——美国转基因标识风波
在美国,关于转基因食品的争论主要集中在是否要标识上。关于禁止各州强制标识转基因食品的法案,日前获得美国国会众议院通过,迈过了最终成为法律的关键第二步。然而,贴还是不贴,美国转基因标识风波仍未结束。 距离新法还有两步 日前,美国众议院以275票支持、150票反对通过《安全准确的食品标签法案》。根据这一法案,食品企业可不标注产品是否含有转基因成分,不遵循美国某些 …
阅读更多 »怎样纯化信号通路关键性酶?
随着老龄化的不断加剧,癌症逐渐成为威胁人类生命和健康的最可怕的敌人。为检测药物对肿瘤信号通路关键酶的作用,实验中经常通过基因重组技术,获得大量的外源性蛋白,并通过体外酶活检测来筛选化合物,为细胞水平和体内检测提供很好的基础。下面就如何纯化肿瘤信号通路关键性酶进行简单的介绍。 1、获得重组质粒 1)通过查阅文献或者资料,找到目标蛋白存在的细胞类型以及序列的CD …
阅读更多 »小鼠大脑皮层神经元原代细胞培养步骤
小鼠大脑皮层神经元原代细胞培养步骤: 1、 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠脑; 2、 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块; 3、 移入培养皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,37℃培养箱中消化30min; 4、 将皮层组织碎块移入离心管,弃去剩余消化液,用接种液洗3次,每次洗涤 …
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