其它

       确定每种细胞类型的最佳细胞密度，以使电穿孔效率最大化。在含电转试剂的终体系中，电穿孔时的细胞密度一般在1-10×10^6细胞/ml范围内。对于悬浮细胞，最好是接近10×10^6细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞，建议的细胞密度为1-5×10^6细胞/ml。 如需了解更多关于电转染试剂的信息，请点击https://www.engreen.com …

    悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。 目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞 …

1，        质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 2，        质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转 …

      需要，可用一个孔检测一下，因为有培养基中可能含有氧化还原反应的物质，在正式实验之前有必要先确认培养基和CCK8 是否反应。一般正常在的OD 值应该在0.4 以下。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成，即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建，能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白；载体成分则与包装成分互补，即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列，同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转染包装细胞，即可在细 …

文章标题 《沉默LINC00987通过调控miR-4458/HMGA2轴改善急性髓系白血病对阿霉素的耐药性》 英文标题：Silencing LINC00987 improves adriamycin resistance in acute myeloid leukemia by regulating the miR-4458/HMGA2 axis 期刊与影响 …

       建议每次做。虽然细胞是一样的，但是细胞的状态不一定一样，对于状态不一样的细胞，建议每次做标准曲线。如果试剂的批号不一样，灵敏度可能会有轻微的差异，对于不同的批号建议分别做标准曲线。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

细胞相比转染效率不可重复原因： 1.细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 2.细菌污染。可使用Entranster试剂，培养基可加抗生素，避免细胞污染。 3.细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 4.血清质量不稳定。用同一批号的血清。

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …

我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loading buffer100度充分变性，再分装保存。有些时候比蛋 …