2025年 12 月 5日, 星期五
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细胞转染实验效率影响因素

细胞转染效率受多种因素影响,主要因素有下面几个: 1.转染试剂       不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒的转染试剂,如Entranster …

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熬夜改变基因 或诱发慢性病

回放: 最近,《临床内分泌学和新陈代谢期刊》发表了瑞典乌普萨拉大学和卡罗林斯卡医学院科学家的研究成果。他们招募了15名健康的男性志愿者进行睡眠实验,发现一夜不眠后,志愿者生物钟核心基因的表达发生了改变。 疑问: 仅仅通宵一晚就会改变基因表达?睡眠和哪些生命活动有交叉?睡眠时间的长短又与哪些疾病有着密切联系? 解答: 睡眠受两方面因素影响,即生物的昼夜节律和睡 …

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细胞转染注意事项

1.如为贴壁生长细胞,一般要求在转染前一日,必须应用胰酶处理成单细胞悬液,重新接种于培养皿或瓶,转染当日的细胞密度以70-90%(贴壁细胞)或2×106-4×106细胞/ml(悬浮细胞)为宜,最好在转染前4h换一次新鲜培养液。 2.用于转染的质粒DNA必须无蛋白质,无RNA和其他化学物质的污染,OD260/280比值应在1.8以上。 3.培养基中的血清 在开 …

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电转染实验时的细胞密度是多少比较理想?

      电转染实验时,确定每种细胞类型的最佳细胞密度,以最大限度地提高电穿孔效率。在随后的实验中以这个细胞密度为标准检验实验的重复性。对于大多数悬浮细胞,建议电穿孔时的细胞密度为10×10^6细胞/ml。对于贴壁细胞,建议细胞密度范围为1-5×10^6细胞/ml。 如需了解更多关于电转染试剂的信息,请点击 …

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如何做好细胞电转染实验?

要想做好细胞的电转染实验,应注意以下几点: 1.   选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2.   选择合适的细胞 用于电转的细胞 …

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HepG2细胞的电转染条件是什么?

使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时HepG2细胞的电转染条件是: 对于0.2 cm电转杯,细胞密度为5×10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为170V, 电容为950μF。 对于0.4 cm电转杯,细胞密度为5×10^6 cells/ml,DNA用量为5μg,电转液体积为250 …

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siRNA转染后细胞死亡是什么原因?

      siRNA转染后细胞死亡,原因也是多样的,如脂质体毒性,转染浓度过高,转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生,这种情况下就需要适当优化转染条件;可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂,如Entranster试剂,另外,如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的,出现细胞死亡的 …

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英格恩15周年庆,你准备好了吗?

15周年庆,我们准备好了活动时间:2022.3.3—2022.3.15 —公司简介— 英格恩(EngreenBiosystem,Ltd.)是一家15年专注转染、微量蛋白检测、细胞培养和保存以及病毒感染等领域的专业公司。 2007年—2022年,公司先后推出DNA、小片断RNA转染试剂、动物体内转染试剂、高灵敏ECL发光液、病毒转染增强的试剂、电转染试剂等。 …

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悬浮细胞该如何转染?

    悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。     目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞 …

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