问题1:“感染两天,puro杀3天,5天细胞都长很密” 原因: 细胞分裂快(比如 293T)→ 在5天内即使有筛选,还是会长满。 感染率高 → 很多细胞表达抗性,嘌呤霉素筛选不够“稀释” 建议: 缩短时间:感染 24h 后就加 puromycin,第 2 天开始杀,杀 2–3 天就足够。 更稀释的病毒梯度:推荐加大稀释倍数:1:1000,1:5000,甚至 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染研究
如今,人类胚胎干细胞中小干扰RNA(siRNA)或质粒DNA(pDNA)低转染效率已经成为遗传操作的关键问题。对于高效转染siRNA和质粒进入胚胎干细胞的方法的发展需求变得越来越迫切。现分享一篇RNA转染(Entranster)与人类胚胎干细胞转染的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞电转染实验注意事项
选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 细胞的选择 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2d)。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛,表面结构致密比稳定 …
阅读更多 »RNA转染与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »通过调节信号轴抑制前列腺癌症增生
文献概要 标题: miR-197-3p Represses the Proliferation of Prostate Cancer by Regulating the VDAC1/AKT/β-catenin Signaling Axis 期刊: International Journal of Biological Sciences 影响因子: 2021年 …
阅读更多 »Am J Cancer Res | 北京大学附属医院报道:软骨肉瘤治疗研究新进展
该团队在《Am J Cancer Res》期刊发表了题为“BMPR2-pSMAD1/5 signaling pathway regulates RUNX2 expression and impacts the progression of dedifferentiated chondrosarcoma”的研究论文。论文实验使用了RNA体内 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与人喉鳞状细胞癌研究
喉癌是头颈部第二常见的恶性肿瘤,最常见的表现为鳞状细胞癌。这种疾病的发病率正在增加,然而,其发展的机制尚不完全清楚。因此,寻找新的喉鳞状细胞癌(LSCC)的诊断和治疗方法变得尤为重要。 现分享一篇RNA转染(Entranster)与siRNA靶向骨膜蛋白对人喉鳞状细胞癌抑制作用研究的文献,以供参考。 文献地址:http://europepmc.o …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与神经炎症和创伤性脑损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是导致儿童很成年人死亡和残疾的主要原因之一。被称为重要的继发性损伤机制的神经炎症在TBI引起中枢神经系统损害的过程中发挥有害或有益的作用。然而,持续和过度的炎症会加重TBI后神经元细胞凋亡。现分享一篇体内转染(Entranster)与神经炎症和创伤性脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与冠状动脉微栓塞相关的心功能不全研究
冠状动脉微栓塞(CME)是一种常见的临床事件,可自发或由程序相关的动脉粥样硬化斑块破裂急性冠状动脉综合征患者,特别是在经皮冠状动脉介入治疗(PCI)导致。大隐静脉移植物经皮介入治疗的发生率高达45%。由CME引起的短暂“无血流”或“慢血流”是急性心肌梗死患者长期预后不良的独立预测因素。此外,CME还可导致渐进性心肌功能异常,包括显性心肌梗死、收缩功能障碍、心 …
阅读更多 »动物体内转染,不同的注射方法,如何评估干扰效率?
运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后,针对具体的组织器官,不同的注射方法会明显影响效果。比如,大脑神经细胞的体内转染,可以采用尾静脉注射和侧脑室注射,用侧脑室的方法就好得多。再比如,肺部的体内转染,用气管灌注就比用尾静脉注射的方法好得多。体内转染试剂和核酸的混合物与靶器官的接触越直接越充分,效 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享