英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一种糖蛋白激素，在红细胞生成中起着重要的调节作用，并启动应对环境挑战的细胞稳态反应。青藏高原是缺氧适应的天然实验室。软刺裸鲤（Gymnocypris dobula）是一种高度专业化的高原裂胸鱼，隶属于青藏高原海拔大于4500米的高海拔淡水河和池塘。但EPO在裂腹鱼适应低氧中的作用尚不清楚。现分享一篇DN …
阅读更多 »mRNA细胞转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下mRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么 …
阅读更多 »ECL发光液（Enlight）与五味子醇乙促进肝再生研究
肝再生是肝损伤后恢复的重要过程，是肝部分切除术（PHx）后的一种很有前景的临床策略。五味子醇乙（Schisandrol B，SOLB）是从华中五味子提取的一种生物活性成分，对小鼠药物性肝损伤具有明显的肝保护作用。然而，SOLB对PHx肝再生的影响尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与五味子醇乙促进肝再生研究的文献，以供参考。
阅读更多 »Cell Death Discovery | 南京大学口腔医学院：牙周膜成纤维细胞铁下垂机制新发现
《Cell Death Discovery》期刊上发表的题为“Periodontitis-level butyrate-induced ferroptosis in periodontal ligament fibroblasts by activation of ferritinophagy“的文章表明牙周炎水平的丁酸盐通过激活 NCOA4 …
阅读更多 »siRNA转染（engreen）与树突状细胞表观遗传修饰研究
根据不同的环境，树突状细胞（DC）可能变现为活跃或耐受性，但表观遗传修饰是否参与这些过程鲜为人知。现分享一篇siRNA转染（Entranster-R4000）与树突状细胞的表观遗传修饰研究的文献，显示表观遗传修饰可以调节人体单核细胞来源的DCs（DC）分化为活性或耐受DC。
阅读更多 »体内转染（engreen）与骨关节炎软骨细胞凋亡研究
骨性关节炎（OA）是一种退行性关节疾病，其特征是软骨破坏、关节边缘骨赘形成（骨赘）、软骨下骨硬化、关节囊改变，以及滑膜的炎症等。OA是关节炎最常见的形式，是老年人疼痛和残疾的主要原因，OA对女性的影响比男性大。OA患者最常见的症状是关节疼痛和僵硬，其他症状可能包括关节肿胀、四肢无力和麻木及运动范围减小等。现 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与5-羟色胺和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一，它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病（T2DM）相关。在NAFLD中，肝脏发生过量脂质合成（ELS），主要包括新的脂肪生成和三酰甘油（TG）以及极低密度脂蛋白（VLDL）的合成，导致脂质积聚 …
阅读更多 »RNA转染与MDSC细胞和原发性干燥综合征研究
原发性干燥综合征（PSS）是一种全身性自身免疫性疾病。以外分泌腺的淋巴细胞浸润为特征的，主要是唾液腺和泪腺，导致分泌功能的丧失。虽然PSS的病因仍不清楚，但许多研究已经证实树突状细胞（DCS）、NK细胞、B细胞和T细胞参与了SS的发病机制。最近的研究发现，Th1和Th17免疫应答在PSS的发展中起着关键性的作用。髓系来源的抑制性细胞（MDSC）是具有免疫抑制 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与海参肠道再生相关的Wnt信号通路研究
许多棘皮动物是具有特殊再生能力的再生物种，海参是一种具有代表性的生物，可以在切除内脏后再生整个肠道。再生过程中有许多信号通路参与，但尚不清楚哪一条是肠道再生所必需的。现分享一篇体内转染（entranster）与海参肠道再生相关的Wnt信号通路研究的文献，以供参考。 文献地址：https://www.frontiersin.org/article …
阅读更多 »如何能够做好siRNA转染实验？
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
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