siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起,常见的因素包括: siRNA设计不合理: siRNA的靶点选择不佳,未能有效靶向目标基因的mRNA,导致抑制效果差或反而激活了基因表达。可以尝试设计不同的siRNA靶点或使用更为优化的siRNA工具进行设计。 转染效率问题: 低转染效率可能导致siRNA无法进入足够多的细胞,从而未能有效抑制目标基因。 …
阅读更多 »SCI:调节心肌梗死的关键基因
心肌梗死是通过心肌细胞死亡诱导心脏衰竭一个重要原因。然而,唾液酸在心肌细胞凋亡中的作用机制尚不清楚。最近,大连医科大学的研究人员在关于心肌梗死的研究中发现,唾液酸转移酶siat7a是心肌梗死的重要影响因素。这项研究结果发表在最近的《Basic Research in Cardiology》杂志,可以帮助揭示心肌梗死治疗的潜在靶标。 心肌梗死(myocardi …
阅读更多 »siRNA转染效率低的原因有哪些?
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与二氢杨梅素抑制NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研究
越来越多的证据表明,细胞焦亡和炎性细胞程序性死亡与动脉粥样硬化有关;然而,其潜在的机制仍有待澄清。二氢杨梅素(Dihydromyricetin,DHM),一种天然的黄酮类化合物,据报道有抗氧化和抗炎的生物活性。然而,DHM对于动脉粥样硬化相关细胞焦亡的影响尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与二氢杨梅素抑制 NLRP3炎性体依赖的细胞焦亡研 …
阅读更多 »如何提高siRNA细胞转染效率
为了达到高的siRNA转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RN …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小鼠急性肝衰竭研究
过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)被激活以改善急性肝衰竭患者肝损伤(ALF)。然而,其内在的保护分子机制在很大程度上尚未确定。C/EBP同源蛋白(CHOP)是脂多糖(LPS)的重要介质引起的炎症。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与小鼠急性肝衰竭研究的文献,以供参考。
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 海军医科大学王文忠教授团队报道:改善高血压氧化应激的新策略
王文忠教授团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了“β-Arrestin1 Reduces Oxidative Stress via Nrf2 Activation in the Rostral Ventrolateral Medulla in Hypertension”论文,研究结果证实b-arrestin1 的过表 …
阅读更多 »RNA转染与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(OE-MSCs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应,包括调节性T细胞(Treg)的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,IL-17在胶原诱导性关节炎(CIA)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态 …
阅读更多 »慢病毒浓缩纯化的方法有哪些?
慢病毒纯化工艺,依据其纯化原理主要分为超速离心、密度梯度离心、PEG离心、超滤、切向流、离子交换层析等方法。当前主要的慢病毒纯化均是由上述中的一种或几种方法组合在一起完成。 对于大部分的细胞感染以及普通的动物实验来说,推荐使用超速离心方法对慢病毒进行浓缩。超滤过程中留下的细胞碎片会导致细胞毒性,直接影响病毒的应用。 病毒上清/粗纯病毒 科研级慢病毒 科研 …
阅读更多 »如何解决病毒感染细胞效率低的难题?
病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用病毒感染增强剂Envirus-LV来提高感染效率。 病毒感染细胞本来效率就较低,整个过程相对复杂难操作,一般一次花费周期至少两三个月,多则几个月到十几个月不等,经费也是几万到十几万。万一实验失败需要重复操作会花费更多的时间和开支。所以有效提高病毒转染效 …
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