英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
根据病毒的TCID50值计算给毒的MOI（Multiplicity of Infection，感染倍数）通常需要几个步骤。MOI 是指每个宿主细胞上平均感染的病毒颗粒数。 步骤概述： 知道病毒的TCID50值：TCID50 是一种病毒活性的度量，表示每单位体积（通常为每毫升）病毒悬液中，能在 50% 的细胞文化中引起感染的病毒数量。单位通常是病毒颗粒数/毫升 …
阅读更多 »PRMT5抑制Wnt信号通路阻碍小鼠胃癌发生
文献标题 PRMT5 acts as a tumor suppressor by inhibiting Wnt/β-catenin signaling in murine gastric tumorigenesis （中文译名：PRMT5通过抑制小鼠胃癌发生中的Wnt/β-catenin信号传导，起到肿瘤抑制作用） 影响因子 IF:10.75 ,该文章发表于 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与病理性色素沉着研究
皮肤色素沉着是通过黑色素细胞中黑色素的合成而形?的。黑素细胞是一种上皮细胞，主要位于表皮的基底细胞层，少数黑素细胞位于粘膜。由黑色素组成的色素颗粒可以分布和运输到邻近的角质形成细胞。黑皮质素-1受体（MC1R）的突变是人类皮肤晒黑和色素沉着的关键。现分享一篇DNA转染（Entranster）与病理性色素沉着研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞铺板密度对于siRNA转染为什么很重要？
RNA转染试剂Entranster-R4000成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细胞数量较少时转染效率高，一些试剂由于本身毒性的影响，太低的细胞数量时毒性明显，所以会要求较高的细胞密度（汇合度），顺便说一句，看一个转染试剂 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA（siRNA）是通过RNA干扰（RNAi）在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具，由于RNAi利用天然途径，即在蛋白质翻译发生之前，在转录后水平上关闭基因表达，因此，siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送 …
阅读更多 »腺病毒适用于哪些细胞？
重组腺病毒（AdV）是一种复制缺陷的腺病毒载体系统，在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。目前常用的腺病毒载体基于人腺病毒5型（Ad5），其基因组是36 kb长的线性双链DNA。腺病毒可通过自身的纤维（fiber）和细胞表面的受体结合被内吞进入细胞，然后从内吞体（endosome）转移到细胞质和细胞核内，借助细胞的转录和翻译机器启动病毒的复制组装。一 …
阅读更多 »ECL发光液的选择
做western-blot实验时，选择一款好的发光液对实验的成功很重要，否则很容易发生各种问题，如淬灭，背景高，不灵敏，发光时间短等。比如淬灭，我觉得Western Blot“淬灭”的原因主要在两方面：含HRP的抗体和发光试剂。由于长期应用某种发光试剂，人们多注意了抗体，不知道发光试剂其实也会对实验结果造成 …
阅读更多 »体内转染与microRNA-27a控制结核分枝杆菌的细胞内存活研究
结核分枝杆菌（MTB）引起的结核病每年造成数百万人死亡，由于耐药结核病的快速增长，迫切需要开发新的抗结核药物。虽然自噬可调节MTB的细胞内存活，但钙离子（Ca2+）信号在MTB感染期间调节自噬的作用仍不清楚。现分享一篇体内转染与MicroRNA-27a通过调节钙化相关自噬来控制结核分枝杆菌的细胞内存活研究的文献，以供参考。 文献地址：https …
阅读更多 »电转染实验时，siRNA有什么要求？
使用高纯度、无菌的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。建议在250-750nM最终浓度范围内的进行siRNA不同浓度的梯度实验。建议设置一个非靶向或无意义的siRNA对照序列，以验证实验siRNA的特异性。同时也验证，针对单个基因用多个siRNA序列实验产生的表型是否是由于脱靶 …
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