英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与环状非编码RNA减少基因脱靶效应研究
环状RNA在许多生物系统中被发现。它们大多被认为是microRNA的分子“海绵”，具有许多未知的生物学活性。小干扰RNA作为许多非编码RNA之一，已成为基因表达调控和药物治疗的重要工具。虽然由siRNA介导的靶mRNA裂解具有高度的序列特异性，意外“脱靶”沉默内源基因在细胞中也观察到，这限制了siRNA的进一步应用。脱靶效应的siRNA也能诱导 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与树突状细胞相关miRNA调节研究
表观遗传修饰在基因表达调控中起关键作用。为了了解表观遗传修饰在不同的环境中如何改变单核细胞来源的树突状细胞（DC）miRNA的表达，现分享一篇RNA转染（Entranster）与树突状细胞相关miRNA调节研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究
近年来，对肠促胰岛素和骨的关系的兴趣不断增加。之前的研究已经表明胰高血糖素样肽-1（GLP-1）及其受体激动剂对骨骼代谢具有有益的合成代谢作用，如通过肠-骨轴促进成骨细胞的增殖和分化。然而，对于GLP-1对成骨细胞凋亡的影响及其相关机制并不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster）与利拉鲁肽和MC3T3-E1细胞凋亡研究的文献，以供参考。
阅读更多 »质粒被酶切过还可以电转吗？
可以，但得分情况来看： 如果质粒是线性化了（即被酶切成线状DNA）： 可以电转，但是效率明显低于超级螺旋质粒（超螺旋 plasmid，通常是未切割、天然状态下的质粒结构）。 线性质粒在细胞内容易被核酸酶降解，稳定性和转化成功率比超螺旋质粒低很多。 有些时候，比如做基因组编辑（CRISPR knock-in）、整合型表达载体（需要基因组插入时），反而故意使用线 …
阅读更多 »ECL发光液与hexarelin来减轻动脉粥样硬化研究
动脉粥样硬化（AS）是一种进行性的血管疾病，其特征是大动脉内膜和管腔内脂质积聚、炎症、动脉粥样硬化性斑块形成和纤维化，是冠心病的主要原因，并导致心肌梗死。有效的抗AS药物目前在临床上还很少见。因此，迫切需要开发新的抗AS药物，以减少AS的并发症。现分享一篇ECL发光液（enlight）与hexarelin来减轻动脉粥样硬化研究的文献，以供参考。 …
阅读更多 »如何利用好腺病毒感染的原理和特点？
一、原理 腺病毒(Adenovirus，Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒，其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型，大多数Ad载体都是基于血清型2和5，通过转基因的方式取代E1和E3基因，降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制，因此是一种适用于治疗的高效控制系统。 二、特点 1） 几乎可以感染所有类型的细胞 2） …
阅读更多 »DNA转染（entranster）与基因载体的膜亲和力研究
在基因治疗中，核酸的有效转染依赖于基因载体的作用。这些载体保护核酸免受人体循环系统中核酸酶的降解，并将遗传物质作为治疗疾病的基因药物导入靶细胞。 一个有效的基因载体应该能够压缩目标基因，将其导入所需的宿主细胞，释放遗传物质，并使其与基因组结合。在基因转染过程中，基因载体对细胞膜的亲和力是与其转染效率密切相关的一个关键参数。 现分享一篇DNA转 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫研究
黑色素瘤是增长最快的恶性肿瘤，因此是一种最危险的皮肤癌类型。MiRNA（miR）‑128，这是一个公认的抑制肿瘤生长的因子，可参与树突状细胞抗肿瘤作用，然而，mir-128与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫功能仍待澄清。现分享一篇mirRNA转染（Entranster）与树突状细胞介导的抗肿瘤免疫研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞RNA转染注意事项
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
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