2026年 8 月 5日, 星期三
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英格恩技术资料

做好RNA转染的几点建议

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …

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RNA转染与非连接蛋白Cx32在宫颈癌细胞中作用的研究

缝隙连接蛋白(Cx)构成脊椎动物的缝隙连接(GJ),可调节重要的细胞过程,包括电耦合,增殖,分化和凋亡。与最初在上世纪60年代提出的“接触增长抑制”概念一致,GJ和CX被公认为肿瘤抑制;恶性肿瘤的特点是GJ的缺失。在恶性肿瘤细胞中,转染Cx以GJ依赖的方式提高放疗/化疗诱导的细胞凋亡(有毒的“旁观者效应”)。Cx在宫颈癌中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染 …

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体内转染(Entranster)与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究

      缺血性中风是导致全球范围内死亡和残疾的主要原因之一,是一个重大的公共卫生问题。为了阐明了缺血性脑损伤的病理机制,科研人员付出了巨大的努力。为此,针对中风引起的神经炎症是治疗中风的一个有吸引力的策略。现分享一篇体内转染(Entranster)与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究的文献,以供参考。

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嘌呤霉素筛选标记的病毒滴定 Protocol

关于使用嘌呤霉素筛选标记的慢病毒或逆转录病毒进行病毒滴定的 protocol,整理了一个常用且较为权威适用于慢病毒系统: 【嘌呤霉素筛选法的病毒滴定 Protocol】 原理简述: 将病毒感染宿主细胞,使用嘌呤霉素筛选,仅有成功整合了抗性基因的细胞能存活。最后通过计数存活细胞(克隆或整体密度)来估算病毒滴度。 实验材料: 病毒上清; HEK293T 或其他易 …

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RNA转染(entranster)后沉默现象不明显怎么办?

可能原因: 1. RNA与转染试剂比例不佳。可进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳。 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。 3. RNA效率不高。选择最优RNA,并采用已知高效的RNA做对照。 4. RNA酶污染。建议无RNA酶和内毒素的吸头、离心管和溶液等材料和实验器具。 5. 转染后培养时间不够。在mRNA水平可以到48 小时以后验证结果,在蛋白水 …

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动物实验系列篇章之二——实验动物的编号和分组

一、编号 实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。 (一)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。 (二)打号法:用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打 …

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体内转染与linc-smad7促进成肌细胞分化和肌肉再生研究

      骨骼肌来源于胚胎发育过程中的体细胞,这是一个高度协调的过程,涉及到成肌细胞增殖、分化的各个发育阶段,最终融合成多核肌管和肌纤维。这些发育阶段主要是由一系列肌源性调节因子(mrfs)确定,包括肌源性D、肌源性因子5(myf5)、肌生成素和mrf4,以及肌细胞增强因子2(mef2)家族。之前的研究表明,LncRNAs在表观遗传动力学和基因表达方面具有 …

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体内转染与miRNA-155拮抗剂和红斑狼疮肺泡出血研究

      系统性红斑狼疮(SLE)是一种慢性自身免疫性疾病,可影响多器官系统。狼疮患者的临床表现差异很大,从轻微的皮肤受累到严重的和危及生命的内脏疾病。肺部通常受到系统性红斑狼疮的影响,并可发展为胸膜、实质、血管和气道疾病。弥漫性肺泡出血(DAH)是SLE最严重的并发症之一,在狼疮患者队列中报告的发病率为1%到5.4%。尽管DAH相对罕见,但其死亡率很高, …

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