英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »问：现在是将构建好的质粒电转入到自制的感受态细胞里，质粒有10000bp，是90μL感受态细胞中加3.5μ质粒。我之前有电转过6000多bp的质粒，过夜培养可以长菌的。但是这个10000bp的质粒过夜培养没有单菌落，延长培养时间后有个别单菌落，但是挑单菌落到LB中并不浑浊。这种情况我是应该调整一下电转程序还是改一下加入质粒的量呢？
以下是详细的优化建议： 优化质粒用量（首要调整）： 问题： 你目前使用的是3.5µL质粒加入90µL感受态细胞。关键在于质粒的浓度（ng/µL），而不是体积。 3.5µL 对于90µL感受态细胞来说体积不小，如果质粒浓度较高，实际DNA量可能大大超过电转最优范围。 原理： 过量的DNA会导致电击时产生过多的热量和离子效应，严重降低转化效率，尤其对大质粒（&g …
阅读更多 »ECL发光液（Enlight）与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究
少突胶质细胞（ODNs）是中枢神经系统（CNS）的主要细胞，对神经元功能至关重要。中枢神经系统髓鞘异常是多种神经系统疾病的特征，包括白质损伤、多发性硬化和视神经脊髓炎。脱髓鞘的原因通常包括免疫损伤、兴奋毒性、病毒感染、肌营养不良和氧化应激。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与咪康唑对早产大鼠脑白质损伤的髓鞘保护作用研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与microRNA-31对脓毒症大鼠肠屏障功能障碍影响的研究
脓毒症是一种危及生命的临床综合征，其特征是同时存在感染和全身炎症反应。脓毒症的常见临床表现与全身炎症反应综合征和器官功能障碍有关，包括血流动力学不稳定、低氧血症和肠屏障功能障碍。此外，肠道内含有内源性和外源性微生物，据报道，这些微生物是脓毒症的潜在病原体，也可能因脓毒症而易受缺血再灌注损伤。肠屏障功能障碍可导致脓毒症继发性细菌移位和多种器官功 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与siRT3过表达抑制肾肿瘤细胞生长研究
SIRT3是NAD+依赖性的线粒体蛋白脱乙酰酶，参与调节中枢代谢和线粒体蛋白稳定。SIRT3在肾透明细胞癌（CCRCC）中被下调，这是肾癌的最常见形式。尽管ccRCC具有典型的Warburg样表型、线粒体功能障碍和脂肪沉积增高的特征，但SIRT3是否参与肿瘤的发生和发展尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与siRT3过表达抑制肾肿瘤细胞生长研究 …
阅读更多 »英格恩产品在一些常见肺部疾病研究中的应用
文献分析：肺部疾病实验及英格恩产品的作用 文献1： 标题：Divergent Roles of miR-3162-3p in Pulmonary Inflammation in Normal and Asthmatic Mice as well as Antagonism of miR-3162-3p in Asthma Treatment 期刊：Inter …
阅读更多 »体内转染与细胞死亡因子4/NF-κB和猪心脏功能障碍研究
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的和重要的临床现象，急性冠状综合征（ACS），和那些接受溶栓治疗、经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的患者都会出现冠状动脉微栓塞现象。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in vivo）方法研究细胞死亡因子4/NF-κB在猪冠状动脉微栓塞引起的心脏功能障碍中的发生机制的文献，以供参考。
阅读更多 »自噬依赖性Axin2+癌症干细胞样细胞促进肝硬化肝癌发生
文献标题 英文： Autophagy-dependent generation of Axin2+ cancer stem-like cells promotes hepatocarcinogenesis in liver cirrhosis 中文： 自噬依赖性Axin2+癌症干细胞样细胞的产生促进肝硬化中的肝癌发生 影响因子 7.385 (注：此该文章发表 …
阅读更多 »Nature Communications | 中国药科大学齐炼文教授团队报道：治疗II型糖尿病的新策略
齐炼文教授团队在《Nature Communications》期刊发表了题为“Inactivation of NF-κB2 (p52) restrains hepatic glucagon response via preserving PDE4B induction”的II型糖尿病治疗最新研究成果。该研究采用了RNA体内转染试剂（Entra …
阅读更多 »体内转染siRNA（Entranster）研究干扰脊神经背根神经节受体
颈交感神经节交感兴奋性活动是由心脏传入激活诱导的，交感神经兴奋性可以增大心肌缺血进一步增加心肌耗氧量而短暂的增强收缩以维持心脏功能。外科干预交感神经传入通路可消除或减轻心绞痛。心肌缺血可产生多种化学物质，作用于心脏传入神经。腺嘌呤核苷酸（ATP）是由交感神经释放，参与信号的传输通过作用于P2X受体。P2X …
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