Q1: 一个孔中应接种多少个细胞? A1: 当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 Q2: 能否用3 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)研究巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化
肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程,包括基因突变或表观遗传变化等多种因素,导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明,慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关,而许多流行病学研究表明,慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染(Entranster-in v …
阅读更多 »体内转染与microRNA-31对脓毒症大鼠肠屏障功能障碍影响的研究
脓毒症是一种危及生命的临床综合征,其特征是同时存在感染和全身炎症反应。脓毒症的常见临床表现与全身炎症反应综合征和器官功能障碍有关,包括血流动力学不稳定、低氧血症和肠屏障功能障碍。此外,肠道内含有内源性和外源性微生物,据报道,这些微生物是脓毒症的潜在病原体,也可能因脓毒症而易受缺血再灌注损伤。肠屏障功能障碍可导致脓毒症继发性细菌移位和多种器官功 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与黍稷中纯化的阳离子过氧化物酶可诱导人结肠癌细胞程序性坏死研究
由于细胞通过不同的凋亡方式进行程序性死亡,抗凋亡剂的癌细胞可能会对程序性坏死的诱导剂敏感。许多传统的被批准进入市场或者临床试验的化疗或分子靶向药物被确定为某些癌细胞的程序性坏死的诱导剂。这些药物包括紫草素及其类似物,β-拉帕醌和eupomatenoid-5等。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与黍稷中纯化的阳离子过氧化物酶可诱导人结肠癌细胞程序性坏死研 …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与丙戊酸钠增强肝细胞脂肪变性研究
丙戊酸钠(Valproate,VPA)是一种广谱抗癫痫药物,已广泛应用于各种抽搐,双极性,或分裂情感障碍等癫痫的治疗。据报道,VPA治疗是一个长期的过程,甚至需要终身服药。然而,在整个VPA抗癫痫治疗过程中会发生药物不良反应(ADR),如肝毒性、肥胖、出血性胰腺炎、骨髓抑制和血氨过多性脑病。其中肝毒性是限制丙戊酸持续使用的最常见、最严重的不良反应 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之一——实验动物的抓取和固定
在进行实验时,为了不损伤动物的健康,不影响观察指标,并防止被动物咬伤,首先要限制动物的活动,使动物处于安静状态,工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前,必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴,不能恐吓动物,同时,要爱惜动物,使动物少受痛苦。 一、小鼠 小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。通常用右手 …
阅读更多 »ECL发光液的趣事
时间:2015年8月的某天 地点:某生物公司研发部门 人物:研究的老师 英格恩销售代表 事件:几天前,某生物公司研发部门的一位老师打电话所要一瓶我们英格恩公司的ECL发光液。其实客户买我们的ECL发光液是再正常不过的了,因为在业界我们的ECL发光液还是小有名气的,每年也有几万瓶的销量,有的客户一次性能购买好几升。而且用过的客户反应,我们的ECL发光液效果稳定 …
阅读更多 »动物体内转染注射技巧
尾静脉注射时请掌握注射技巧,一般选用远端1/3 处静脉注射,如感觉到阻力和轻微隆起,请停止注射,重新寻找静脉进行操作,不要强力推注,否则容易将药液注射在尾部,导致尾部溃烂。注射完成后移去针头,按压针孔10 秒以上,防止药液流出。局部注射,尽可能多注射药液,有利于提高转染效果 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与甜菊渣提取物改善D-半乳糖诱导衰老小鼠的氧化应激研究
衰老被定义为是机体内部环境的稳定,生理功能和代谢过程不可避免的退化的一个过程。许多疾病与衰老有关,如帕金森病、糖尿病、动脉粥样硬化、阿尔茨海默病、骨质疏松症、骨关节炎和多种癌症。随着老龄化社会的到来,健康越来越受到重视。氧化应激是由活性氧自由基和抗氧化剂不平衡引起的生物过程,可能导致脂质、蛋白质和DNA的氧化损伤,最终导致死亡。科学证据表明,氧化应激在衰老过 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享