英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
问：siRNA导入细胞有哪些方法，哪种最好？ 答：siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。 问：哪种转染试剂效果好？ …
阅读更多 »DNA转染（entranster）与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究
MYC是一种强有力的癌基因蛋白，调节多种细胞过程，包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用，与大量蛋白质相互作用，MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇DNA转染（entranster）与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究
缺血性中风是导致全球范围内死亡和残疾的主要原因之一，是一个重大的公共卫生问题。为了阐明了缺血性脑损伤的病理机制，科研人员付出了巨大的努力。为此，针对中风引起的神经炎症是治疗中风的一个有吸引力的策略。现分享一篇体内转染（Entranster）与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体构建研究
Ｎｅｍｏ样激酶（ｎｅｍｏ-ｌｉｋｅｋｉｎａｓｅ，ＮＬＫ）属于丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在ＮＬＫ的同源蛋白，其结构存在高度的相似性，显示ＮＬＫ在进化过程中十分保守。研究显示，ＮＬＫ能够结合并磷酸化一系列转录因子，参与多个信号通路的调节，其中包括与发育过程密切相关的信号途径Ｗｎ …
阅读更多 »mRNA细胞转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下mRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞（OE-MSCs）是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应，包括调节性T细胞（Treg）的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子，IL-17在胶原诱导性关节炎（CIA）的发展过程中起着关键的作用。然而，目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »siRNA细胞转染应注意的事项
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »体内外RNA转染（Entranster）与sirtuin3和肾缺血再灌注损伤研究
缺血再灌注（I/R）可引起急性肾损伤，其特征是增加活性氧（ROS）和线粒体损伤，并破坏肾小管上皮细胞的细胞极性、细胞骨架完整性和细胞基质和细胞-细胞相互作用。线粒体蛋白sirtuin 3（SIRT3）可能有助于减轻或预防I/R损伤。SIRT3过表达有助于恢复急性肾损伤模型中线粒体的动 …
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
质粒的构建：启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »Cell Death Discovery | 南京大学口腔医学院：牙周膜成纤维细胞铁下垂机制新发现
《Cell Death Discovery》期刊上发表的题为“Periodontitis-level butyrate-induced ferroptosis in periodontal ligament fibroblasts by activation of ferritinophagy“的文章表明牙周炎水平的丁酸盐通过激活 NCOA4 …
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