胰腺癌仍然是最致命的恶性肿瘤之一,5年生存率低于7%,预后差主要是由于该疾病在早期和治愈阶段难以检测到。虽然手术切除是目前唯一可行的治疗方法,但高达80%的诊断为局部恶化或远处转移疾病的患者不适合切除。胰腺癌的诊断和治疗亟待改进。烟酰胺N-甲基转移酶(NNMT)的在胰腺癌中被报道是异常表达。然而,NNMT在胰腺癌发展中的作用仍然是难以捉摸的。现分享一篇ECL …
阅读更多 »Frontiers in Pharmacology | 首都医科大学报道:治疗对乙酰氨基酚过量造成肝损伤的新策略
该团队在《Frontiers in Pharmacology》期刊上发表了题为“GLT25D2 Is Critical for Inflammatory Immune Response to Promote Acetaminophen-Induced Hepatotoxicity by Autophagy Pathway”的论文。实验通过RNA …
阅读更多 »RNA转染(entranster)与il-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(oe-mscs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。oe-mscs通过调节t细胞的反应,包括调节性t细胞(treg)的上调和th1/th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,il-17在胶原诱导性关节炎(cia)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚il-17水平的升高是否会影响oe-mscs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »ECL发光液与猪繁殖与呼吸综合征病毒与胆固醇-25-羟化酶研究
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种免疫调节性病原体,已被公认为调节宿主干扰素(IFN)系统。胆固醇-25-羟化酶(CH25H)是一种重要的干扰素刺激基因(ISG)编码多面体膜蛋白,显著抑制许多病毒的复制。最新研究表明,CH25H抑制PRRSV的复制,同时PRRSV的感染可显著下调CH25H的表达,但涉及CH25H下调的病毒蛋白尚不清楚。现分享一篇EC …
阅读更多 »细胞RNA转染注意事项
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »慢病毒、腺病毒、AAV 的检测周期分别是多长?
慢病毒 腺病毒 腺相关病毒 外源基因表达时间 2-4天开始表达长时间稳定表达 1-2天开始表达 持续7-14天 7-14开始表达 细胞分裂不旺盛部位可长时间表达 AAV一般注射动物后,会在1周左右开始表达,体内实验一般建议感染后3-4周看第一批结果。持续时间可以长达两年以上。在体内,细胞的生存周期会很长,特别是一些神经元细胞。所以只要细胞不死,AAV基本 …
阅读更多 »Crispr/Cas9腺病毒构建流程
Crispr/Cas9 简介 CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白(含有两个核 …
阅读更多 »ECL发光液与hexarelin来减轻动脉粥样硬化研究
动脉粥样硬化(AS)是一种进行性的血管疾病,其特征是大动脉内膜和管腔内脂质积聚、炎症、动脉粥样硬化性斑块形成和纤维化,是冠心病的主要原因,并导致心肌梗死。有效的抗AS药物目前在临床上还很少见。因此,迫切需要开发新的抗AS药物,以减少AS的并发症。现分享一篇ECL发光液(enlight)与hexarelin来减轻动脉粥样硬化研究的文献,以供参考。 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与多肿瘤相关microRNA调控树突状细胞的存活和寿命研究
树突状细胞(DCS)包括传统的DCS和浆细胞样DCS,是诱导适应性免疫和耐受性的关键性的APC。然而,成熟的DCs也在不同组织和器官中发生凋亡,尤其是淋巴结。DC凋亡是调节耐受和免疫平衡的重要事件。肿瘤使用广泛的免疫抑制策略,如降低树突状细胞(DCS)的寿命和存活率,以减少免疫应答并限制免疫治疗的效果。现分享一篇RNA转染(Entranster)与多肿瘤相关 …
阅读更多 »慢病毒感染贴壁细胞实验方法
1.提前一天细胞铺板 提前一天种植细胞,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 感染实验 ⑴将EnvirusTM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成增强剂稀释液。 ⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表),充分混匀,制成病毒稀释液。 注:由于病毒浓度情况不同,具体病毒浓缩液用量酌情依据 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享