英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
siRNA转染后目标基因不降反升的现象可能由多种原因引起，常见的因素包括： siRNA设计不合理： siRNA的靶点选择不佳，未能有效靶向目标基因的mRNA，导致抑制效果差或反而激活了基因表达。可以尝试设计不同的siRNA靶点或使用更为优化的siRNA工具进行设计。 转染效率问题： 低转染效率可能导致siRNA无法进入足够多的细胞，从而未能有效抑制目标基因。 …
阅读更多 »病毒包装过程中，细胞大量死亡，还有必要收集病毒吗
在病毒包装过程中，如果观察到细胞大量死亡，是否还要收集病毒需要根据具体情况判断。以下是一些可能的考虑因素： 病毒滴度：尽管细胞大量死亡，仍然有可能产生高滴度的病毒。如果病毒滴度足够高，可以继续收集病毒用于后续实验。 污染：细胞大量死亡可能是由于污染引起的。如果怀疑有细菌、真菌或支原体污染，收集病毒可能不是一个好主意，因为污染会影响后续实验的准确性。 病毒本身 …
阅读更多 »体内转染siRNA （Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA （Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与PRDX3和肝细胞癌研究
PRDX3是调节细胞氧化还原状态的线粒体过氧化物还原酶。据报道，PRDX3在肝癌中过度表达，但PRDX3在肝细胞癌（HCC）发生发展中的作用尚未得到很好的阐述。现分享一篇ECL发光液（enlight）与沉默PRDX3抑制肝癌细胞生长及促进细胞侵袭和细胞外基质降解研究的文献，以供参考。
阅读更多 »如何评估体内转染实验的效率？
运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后，针对具体的组织器官，不同的注射方法会明显影响效果。比如，大脑神经细胞的体内转染，可以采用尾静脉注射和侧脑室注射，用侧脑室的方法就好得多。再比如，肺部的体内转染，用气管灌注就比用尾静脉注射的方法好得多。体内转染试剂和核酸的混合物与靶器官的接触越直接越充分，效果越好。干扰效率可以理解为干扰的细胞数量和全部细胞的 …
阅读更多 »如何达到较高的RNA转染效率？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与periaxin蛋白和施旺细胞研究
Periaxin蛋白是施旺细胞特异表达的一种蛋白，是其在周围神经髓鞘细胞骨架相关蛋白的筛选中首先被鉴定的。PRX蛋白在髓鞘形成和髓鞘的稳定起到了重要的作用，与肿瘤细胞侵袭转移密切相关。现分享一篇ECL发光液（enlight）与periaxin蛋白和施旺细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »如何优化RNA转染条件？
可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »ECL发光液与重组弓形虫CDPK3接种对实验性弓形虫保护性免疫研究
弓形虫是一种普遍存在的、专性的细胞内病原体，可感染包括人在内的几乎所有的恒温动物。目前尚未有特效药物或疫苗能够防控弓形虫病。钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)广泛的存在于植物、绿藻和顶复门原虫中,且不存在哺乳动物中。CDPKs在钙离子的调控下,主要参与入侵、胞内增值、逸出、运动和蛋白分泌等重要生物功能的调节。由于其不存在于哺乳动物中,CDPKs成为 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与微管稳定性研究
微管介导的细胞事件如细胞内转运和细胞极性的维持高度依赖于微管的稳定性，微管稳定性由细胞中微管相关蛋白（MAPs）的集合控制。MAP7结构域蛋白3（Mdp3）近来被认为是微管稳定性的关键调节因子。然而，如何实现这一功能仍然是不清楚的。现分享一篇DNA转染（Entranster）与微 …
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