使用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行体内转染实验时,由于局部注射容易造成药液分布不均,在注射的近端,药液浓度高,效果明细;远端,药液浓度低,效果低一些。所以,一方面,需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织,另一方面,后续实验取样时,在保证实验的 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与内皮素-1与肺动脉平滑肌细胞研究
肝肺综合征(HPS)是肝病晚期的严重并发症,其死亡率明显增加。循环介质介导的肺血管重构(PVR)在HPS发病机制中起重要作用,但其机制尚不明确。现分享一篇RNA转染(Entranster)与内皮素-1(ET-1)与肺动脉平滑肌细胞研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(entranster)与信号素3A导致创伤性脑损伤后继发性血脑屏障损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是一种危害人类健康的高发病率疾病,随着社会的发展,这种疾病的发病率有上升的趋势。脑外伤死亡率为10.8%,致残率为12%。脑外伤已成为40岁以下人群的第五大死因,年轻人约占脑外伤患者的70%。信号素3A(SEMA 3A)是信号素家族的成员,是一类参与神经网络构建的膜相关蛋白。SEMA3A曾被报道可影响血管通透性,但其在创伤性脑损伤(TB …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与5-羟色胺和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一,它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH),在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病(T2DM)相关。在NAFLD中,肝脏发生过量脂质合成(ELS),主要包括新的脂肪生成和三酰甘油(TG)以及极低密度脂蛋白(VLDL)的合成,导致脂质积聚 …
阅读更多 »动物体内转染后,遗传性转能维持多久?
体内转试剂Entranster转染动物时是属于瞬时的转染,对目标基因的改变,一般注射1次,可以维持7天左右。随后,随着转入的核酸的代谢,效应减弱消失。动物是否回复到原有的生理状态,这与目标基因有关系。如果希望长期维持动物的转染状态,可以多次注射。
阅读更多 »分步转染,先电转GFP-mRNA,表达很好,然后第二天电转了一个红色荧光DNA质粒,第三天观察的时候只看到了少数细胞有红色荧光,看不到绿色荧光了,这是怎么回事呀?按说GFP已经表达了,怎么还能消失了呢
根据你的描述,GFP在第一天有很好的表达,但在第二天转染DNA质粒后,第三天绿色荧光消失,只有少数细胞有红色荧光。这可能涉及到几个不同的因素: 1. DNA质粒表达对GFP表达的抑制 高浓度DNA引起的翻译抑制:你已经电转过mRNA,然后再转DNA质粒,这可能引发细胞对大分子DNA的免疫反应,比如激活干扰素反应。这可能抑制了翻译,不仅影响红色荧光蛋白(DNA …
阅读更多 »QBEmax:一种序列置换且内部保护的碱基编辑器(IF:33.1)
文献标题:QBEmax is a sequence-permuted and internally protected base editor 期刊:Nature Biotechnology 影响因子:33.1(2024年) 文献概要: 胞嘧啶碱基编辑器(CBE)显示出多重基因敲除应用的前景,但不纯的编辑、插入和脱靶仍然经常发生。我们在这里描述了QBEmax …
阅读更多 »ECL发光液与果胶减少环境污染物引起的小鼠肥胖研究
肥胖疾病的流行引起了全球的关注。环境污染物是导致肥胖的主要原因之一。许多研究表明,膳食纤维可以减少高脂肪饮食引起的肥胖,但环境污染引起的肥胖能否逆转还不得而知。现分享一篇ECL发光液(enlight)与果胶通过调节肠道微生物群减少环境污染物引起的小鼠肥胖研究的文献,以供参考。文献地址:https://www.sciencedirect.com/ …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与放射增强质粒DNA转染肿瘤研究
迄今为止,大多数基因治疗临床试验都使用了病毒载体,但仍存在多种担忧,包括致癌风险、急性免疫原性、广泛的组织亲嗜性、DNA包装能力有限,以及安全处理和大规模生产的挑战。对于将基因疗法转化为临床治疗来说,改进这些缺点的DNA传递的替代方法是至关重要的。现分享一篇体内转染(Entranster)与放射增强质粒DNA转染肿瘤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »如何达到更好的siRNA转染效率?
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
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