下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »通过转染双链siRNA 在果蝇S2 细胞中进行RNA 干扰
本方案介绍一种通过试剂向果蝇S2 细胞转运siRNA 以触发RNA 干扰的有效方法。本方案适用于24 孔板内培养的细胞。如果使用其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿,需要根据培养孔的表面积换算细胞密度和试剂用量(表1 ) 。 表1 果蝇细胞转染所用细胞, 转染试剂和siRNA (或者ASO) 的体积 培养板或培养皿 24孔 12孔 6孔 6cm 10cm 每孔 …
阅读更多 »ECL发光液与淫羊藿苷对哮喘小鼠慢性气道炎症抑制作用研究
哮喘是一种常见的慢性呼吸道炎症性疾病其特点是喘息,气促、胸闷、咳嗽,以及呼气气流受限。研究认为哮喘是一种异质性疾病,具有不同的发病机制。淫羊藿甙是从淫羊藿中分离的一种黄酮苷,已报道具有抗骨质疏松、抗炎和抗抑郁的功能。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与淫羊藿苷对哮喘小鼠慢性气道炎症的抑制作用研究的文献 …
阅读更多 »siRNA转染很有效(蛋白水平明显降低),将siRNA序列构建进慢病毒(shRNA形式)后感染细胞,荧光表达很强,但目标蛋白并未敲低,这是什么原因
你遇到的这个问题在慢病毒(lentivirus)介导的RNA干扰实验中其实挺常见,下面我们逐步分析下可能的原因: 实验现象简述: siRNA转染敲得很有效(蛋白水平明显降低); **将siRNA序列构建进慢病毒(shRNA形式)**后感染细胞; 荧光表达很强(说明病毒成功进入细胞,且有表达); 但目标蛋白并未敲低,几乎没有 knockdown 效果。 可能原 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与B淋巴细胞刺激因子和多发性骨髓瘤研究
B淋巴细胞刺激因子(BLyS),一种肿瘤坏死因子超家族成员,是一种有效的体内外B细胞共活化剂,可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤(浆细胞)。先分享一篇RNA转染(Entranster-R4000)与B淋巴细胞刺激因子(BLyS)和多发性骨髓瘤(MM)研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染与细胞程序性死亡因子5与细胞自噬和大鼠缺血性损伤研究
卒中尤其是缺血性卒中,可能导致严重的神经功能障碍,甚至死亡,在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡,并且在脑缺血中,自噬作用在累积。自噬作用是复杂的,取决于大脑的成熟度,区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内转染(Entranster),脑室注射方法研究细胞程 …
阅读更多 »体内转染与microRNA-340-5p在肺动脉高压中的调控机制研究
肺动脉高压(PAH)是一种进行性、致命的疾病,其特征是肺动脉压和血管阻力持续增加,可能导致右心室衰竭,最终死亡。PAH的症状包括运动性呼吸困难、疲劳、胸痛和头晕。此外,当肺血管阻塞时,急性肺栓塞(APE)也可导致肺动脉高压。肺动脉内皮细胞(PAEC)和肺动脉平滑肌细胞(PASMCS)增殖导致晚期血管管腔阻塞。尽管近年来治疗取得了进展,但PAH仍 …
阅读更多 »siRNA转染至细胞有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与树突状细胞相关的miRNA调节研究
表观遗传修饰在基因表达调控中起关键作用。为了了解表观遗传修饰在不同的环境中如何改变单核细胞来源的树突状细胞(DC)miRNA的表达,现分享一篇RNA转染(Entranster)与树突状细胞相关的miRNA调节研究的文献,以供参考。
阅读更多 »调控RUNX2抗骨质疏松研究的新发现
标题: Identification of NIBAN2-Regulated RUNX2 Alternative Splicing Presents Novel Strategies for Antagonizing Osteoporosis 期刊: Adv Sci (Weinh). 2025 Mar 7:e2416536.doi: 10.1002/advs …
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