英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
为了做好RNA转染实验，提出几点关于细胞RNA转染实验的建议，供大家参考： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »siRNA转染常见问题及解答
问：siRNA导入细胞有哪些方法，哪种最好？ 答：siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。 问：哪种转染试剂效果好？ …
阅读更多 »如何解决病毒感染细胞效率低的难题？
病毒感染细胞本来效率就较低，一定要注意以下几点：1.感染时的培养基尽量少些；2. 使用病毒感染增强剂Envirus-LV来提高感染效率。 病毒感染细胞本来效率就较低，整个过程相对复杂难操作，一般一次花费周期至少两三个月，多则几个月到十几个月不等，经费也是几万到十几万。万一实验失败需要重复操作会花费更多的时间和开支。所以有效提高病毒转染效 …
阅读更多 »电转染时，指数衰减脉冲形式的电转条件是什么？
对于engreen的Entranster-E电转染试剂，当使用0.4cm比色杯时，大多数细胞类型的指数衰减脉冲条件在200-300V的电压范围和800-1000μF的电容范围内。对于0.2 cm比色杯时，其范围分别为80-160 V和800-1000μF。对于使用0.4 cm比色杯的电穿孔实验，测试电压范围 …
阅读更多 »ECL发光液的选择
做western-blot实验时，选择一款好的发光液对实验的成功很重要，否则很容易发生各种问题，如淬灭，背景高，不灵敏，发光时间短等。比如淬灭，我觉得Western Blot“淬灭”的原因主要在两方面：含HRP的抗体和发光试剂。由于长期应用某种发光试剂，人们多注意了抗体，不知道发光试剂其实也会对实验结果造成 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与丙戊酸钠增强肝细胞脂肪变性研究
丙戊酸钠（Valproate，VPA）是一种广谱抗癫痫药物，已广泛应用于各种抽搐，双极性，或分裂情感障碍等癫痫的治疗。据报道，VPA治疗是一个长期的过程，甚至需要终身服药。然而，在整个VPA抗癫痫治疗过程中会发生药物不良反应（ADR），如肝毒性、肥胖、出血性胰腺炎、骨髓抑制和血氨过多性脑病。其中肝毒性是限制丙戊酸持续使用的最常见、最严重的不良反应 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小鼠睾丸间质细胞类固醇生成研究
间质细胞对男性生殖发育至关重要。可调控雄激素以及中间激素的分泌。虽然microRNAs（miRNAs）在精子发生过程中起着重要作用，是目前对间质细胞中miRNA对类固醇的调节知之甚少。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与小鼠睾丸间质细胞类固醇生成研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与丹酚酸B和脓毒症相关急性肺损伤研究
脓毒症是一种危及生命的疾病，其特征是器官功能不全。脓毒症被广泛认为是由于感染引起的代偿性抗炎反应和全身炎症反应之间的平衡不稳定。在严重的情况下，炎症、脓毒症可导致急性肺损伤（ALI），更严重地可能会发生急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与丹酚酸B和脓 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究
体外研究骨是困难的，因为它包含参干扰的各种细胞类型。骨生物连接各种器官，因此，骨骼生理学必须以完整的方式在完整的动物中进行研究。现分享一篇体内转染（Entranster）与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内转染（Entr …
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