核心原则 标准物理滴度测定:强烈推荐使用293T细胞。 功能性滴度测定/特定应用验证:使用你的目标细胞。 详细解释 为什么推荐293T细胞测定物理滴度? 高易感性: 293T细胞对慢病毒感染非常敏感,因为它们高表达慢病毒进入所需的受体(如LDL受体)。 高转导效率: 它们通常能达到非常高的转导效率(>80%甚至90%+),这使得检测阳性细胞、计算滴度变 …
阅读更多 »体内转染let-7d(Entranster)与肾细胞癌治疗研究
肾细胞癌(RCC)是成年人肾脏最常见的恶性肿瘤,占肾脏恶性肿瘤的90%以上,恶性程度高。其发病率约为成年人恶性肿瘤的3%,。肾细胞癌预后很差,对放疗、化疗均不敏感。目前,局部肾细胞癌的治疗取得了很大的进展,但是对于转移性肾细胞癌治疗的选择非常有限。因此,鉴定新的肾细胞癌生物标志物以及具有更好疗效的抗肿瘤药物仍亟待解决。mirRNA是内源性的非编 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之六——实验动物各种体液、骨髓的采集方法
一、消化液的采集 (一) 唾液 1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。 2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用外科手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分开,穿过皮肤切口引到颊外,将带有导 …
阅读更多 »如何使动物体内病毒感染效率提高20-50倍
由于动物体内环境的复杂性,我们在选择动物体内病毒感染试剂时,会区别于细胞实验。通常为避免动物产生过激的免疫反应或者死亡,这类病毒感染试剂纯度会更高些,并且适配体液环境。因此,争对动物体内病毒感染实验,则需要适配特定的动物体内病毒感染增强试剂。 发表在《aging》上的一篇题为“Ubenimex induces autophagy inhibition and …
阅读更多 »树鼩CRISPR筛选发现RNF6促进寨卡病毒跨越血脑屏障
标题: Tree Shrew Genome-Wide CRISPR Screen Identifies RNF6 as a Proviral Host Factor for Zika Virus Replication in Brain Microvascular Endothelial Cells (树鼩全基因组CRISPR筛选鉴定出RNF6是寨卡病毒在脑 …
阅读更多 »30个关于CCK-8的Q&A
Q1: 一个孔中应接种多少个细胞? A1: 当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000 个/孔 (100μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。 Q2: 能否用3 …
阅读更多 »RNA转染与mir-155调节胶质瘤细胞增殖和侵袭研究
胶质瘤是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤,尽管治疗有所改善,脑胶质瘤患者的预后和生存率仍然非常差。特别是,根据目前WHO脑肿瘤分类,多形性胶质母细胞瘤是最恶性的胶质瘤。探索胶质瘤发生、发展的分子机制,已成为发展胶质瘤新的治疗策略的迫切需求。最近的研究已经报道了脑肿瘤细胞中miRNAs的改变,表明它们在癌基因或抑癌基因中的作用。 现分享一篇RNA转染(Entran …
阅读更多 »体内转染(entranster)与lncRNAuc.48+对2型糖尿病大鼠肝糖原的影响研究
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组代谢性临床综合征,随着社会的发展和人们生活水平的提高,糖尿病的患病率逐年升高。在发达国家,糖尿病患病率已达3% ~7%,成为仅次于癌症、艾滋病、心脑血管病之后第4位需要优先考虑的疾病,已成为世界第5位死亡主因。我国糖尿病人群的构成,以2型糖尿病为主,占糖尿病人群的90%以上,严重影响着人民健康和社会发展 …
阅读更多 »体内转染与一氧化碳对心脏骤停后改善神经功能作用研究
功能失调的线粒体与心脏骤停(CA)后的神经损伤有关。尽管一氧化碳(CO)在临床前组织损伤模型中显示出各种潜在的治疗作用,但其在CA中的作用机制仍不清楚。现分享一篇体内转染(engreen)与一氧化碳在老年大鼠心脏骤停后改善神经功能的新作用研究的文献,文献旨在研究一种新的一氧化碳放分子对CA术后大脑线粒体功能障碍和神经损伤的影响。 文献地址:htt …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与微管稳定性研究
微管介导的细胞事件如细胞内转运和细胞极性的维持高度依赖于微管的稳定性,微管稳定性由细胞中微管相关蛋白(MAPs)的集合控制。MAP7结构域蛋白3(Mdp3)近来被认为是微管稳定性的关键调节因子。然而,如何实现这一功能仍然是不清楚的。现分享一篇DNA转染(Entranster)与微 …
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