一、原理 慢病毒(Lentivirus)是逆转录病毒的一种。构建的siRNA / miRNA慢病毒载体,与化学合成的siRNA 和基于瞬时表达载体构建的普通 siRNA 载体相比,一方面可以扩增替代瞬时表达载体使用,另一方面,Lentivirus-siRNA 克隆经过慢病毒包装系统包装后,可用于感染依靠传统转染试剂难于转染的细胞系如原代细胞、悬浮细胞和处于非 …
阅读更多 »瞬时转染后,划痕实验的最佳时间
瞬时转染后,划痕实验的最佳时间取决于几个因素,包括转染效率、基因表达时机以及细胞状态。一般来说,常见的策略如下: 1. 24 小时后划痕(常规选择) 绝大多数瞬时转染的基因在 24 小时左右开始有较高的表达水平,因此转染 24 小时后划痕是一个常见的选择。 这个时间点可以确保大部分细胞已成功表达外源基因,同时细胞仍然具有良好的活力,不会因过度表达导致过早凋亡 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与STAT3和髓源性抑制细胞研究
髓源性抑制细胞(MDSC)是一种免疫抑制性网络的主要组成部分。STAT3在调节MDSC方面有重要作用。现分享一篇用RNA转染试剂Entranster-R4000转染miRNA与STAT3和MDSC研究的文献,研究中指出,STAT3的表达可能是由miR-17-5p和miR-20a调节的,研究结果表明miR-17-5p和miR-20a可能通过阻断S …
阅读更多 »动物体内转染注射技巧
尾静脉注射时请掌握注射技巧,一般选用远端1/3 处静脉注射,如感觉到阻力和轻微隆起,请停止注射,重新寻找静脉进行操作,不要强力推注,否则容易将药液注射在尾部,导致尾部溃烂。注射完成后移去针头,按压针孔10 秒以上,防止药液流出。局部注射,尽可能多注射药液,有利于提高转染效果 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小鼠急性肝衰竭研究
过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)被激活以改善急性肝衰竭患者肝损伤(ALF)。然而,其内在的保护分子机制在很大程度上尚未确定。C/EBP同源蛋白(CHOP)是脂多糖(LPS)的重要介质引起的炎症。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与小鼠急性肝衰竭研究的文献,以供参考。
阅读更多 »英格恩动物转染试剂在商业水产品中的研究贡献
1.(IF9.438)文献名称:ceRNA crosstalk mediated by ncRNAs is a novel regulatory mechanism in fish sex determination and differentiation 实验动物:商品鱼 研究内容: 该研究揭示了非编码RNA(ncRNA)通过ceRNA机制调控鱼类性别决定 …
阅读更多 »环状RNA编码的新型蛋白质直接靶向ERK信号传导,以缓解化疗引起的神经性疼痛
文献标题 A novel protein cRERE encoded by a circular RNA directly targets ERK signaling to alleviate chemotherapy-induced neuropathic pain 影响因子 期刊:Cell Communication and Signaling 影响因子 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与PRDX3和肝细胞癌研究
PRDX3是调节细胞氧化还原状态的线粒体过氧化物还原酶。据报道,PRDX3在肝癌中过度表达,但PRDX3在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用尚未得到很好的阐述。现分享一篇ECL发光液(enlight)与沉默PRDX3抑制肝癌细胞生长及促进细胞侵袭和细胞外基质降解研究的文献,以供参考。
阅读更多 »Hela细胞的电转染条件是什么?
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时Hela细胞的电转染条件是: 对于0.2 cm电转杯,细胞密度为3×10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为130V, 电容为950μF。 对于0.4 cm电转杯,细胞密度为3×10^6 cells/ml,DNA用量为5μg,电转液体积为250μ …
阅读更多 »ECL发光液常见问题及解答1
ECL发光灵敏度越高越好吗? A: 不是。大多数实验的蛋白浓度在pg-ng级别,用增强型的发光液就可以。比如英格恩的Enlight发光液。 2.ECL发光液为什么需要避光保存? A:因为ECL发光液里的鲁米那等发光成分很容易因为光而失活,所以需要避光保存。 3.ECL发光液多长时间容易失效,用一瓶ECL试剂,结果有差异,是否是失效了? A:早期的ECL发光也 …
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