细胞培养

小鼠胚胎成纤维细胞(MEF) 作为原代培养细胞，其刺激增殖的能力强且可靠、易培养、来源丰富，常被用作干细胞培养的饲养层。一方面提供刺激干细胞增殖的各种因子，另一方面保持干细胞的未分化状态。虽然MEF 传代次数有限，但可早期冻存一些，不断复苏，保持长期使用。MEF 的缺点是无法耐受G418 的筛选。替代方法是从持续表达neo 抗性的小鼠品系或转基因品系来分离培 …

悬浮细胞的分瓶 轻轻的摇匀培养瓶中的细胞培养物，吸出1 ml 到微量离心管中。 对细胞进行计数，同时观察细胞状态。 计算出稀释倍数，决定种子液的量。 吸出适量的细胞到新的培养瓶中。 加入适量的37°C 预热的新培养基。 把细胞放入培养箱，并把盖子松开。 继续培养母液培养物，不加入新的培养基。注意每次传代后都要保留原液作为备份，以防传代后的细胞被污染。在培养瓶 …

  alkphos 碱性磷酸酶 amp 氨苄青霉素 AMVRT 鸟类粒细胞病毒反转录酶 ANOVA 方差分析 BAC 细菌人工染色体 β-gal  β－半乳糖苷酶 Bis  N, N’－亚甲双丙烯酰胺 bp 碱基对 BPB 溴酚蓝 BSA 牛血清白蛋白 CAT 氯霉素乙酰转移酶 cDNA 互补DNA cfu 菌落形成单位 CMC 临界微囊浓度 C …

由于心血管系统发病率、病死率高，严重威胁人类生命，随着心血管疾病研究的不断深入，以体外培养的血管平滑肌细胞作为研究模型，在心血管疾病，特别是在动脉粥样硬化研究中的应用越来越广泛。 （一）材料与设备 1. 设备超净工作台、离心机、水浴锅、CO2 培养箱、－70 ℃ 冰箱，－20 °C:冰箱。2. 无菌材料培养皿、止血钳、15ml 离心管、刻度吸管、弯头吸管、T …

根据来源分类 原代细胞分离于动物或植物的组织，经培养获得。细胞一旦分裂就成为有限传代细胞株，并且有可能变成无性增殖化细胞。把正常细胞来源的有限传代细胞株持续传代，筛选出快速生长的细胞，就有可能把有限传代细胞祩转变成持续传代的细胞株，这个操作就是自然转化。   来源   与组织相溶性 维护 加倍 原代细胞 动物组织、胚胎或成体 典型 难 0 …

划痕实验是一种简单易行的检测肿瘤细胞运动的方法， 实验成本低， 可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。 （一）材料与设备 6 孔板或者培养皿， 10 μl 或者200μl 无菌的枪头， Marker 笔，直尺。 （ 二）操作步骤 1. 先用Marker 笔在6 孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，每隔0.5-1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5 条线。 …

大多数细胞系增殖的最适pH 为7. 4, 当培养液逐渐变酸或变碱时，细胞的活力和增殖率将呈下降趋势。培养液必须缓冲细胞代谢葡萄糖和谷氨酰胺所产生的CO2 及乳酸。人们曾一度用碳酸氢盐、HCO3–与空气中CO2 共同构成一个缓冲体系，碳酸氢盐的低pka(pka=6. 1) 在pH7. 4 左右产生微弱的缓冲效能。无毒缓冲剂，如PIPES(pka=6 …

培养基可用来有意识地从混合细胞群体中筛选特定性质的哺乳动物细胞。 材料 脾细胞与骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞(10: 1) 含10 ％胎牛血清 的RD 培养基 4X10-5mol/L 氨基喋呤(A 液；用0. 1mol/L NaOH 配制成100 倍浓缩液） 1X10-5mol/L 次黄嘌呤／ 1. 6 X 10-3 mol/L 胸腺嘧啶脱氧核苷，双蒸水配制( …

贴壁细胞 正常情况下观察到的细胞应该是规则均匀分布在培养皿底面上的一层细胞。每种细胞都有其自身的形态特征：球形、三角形、方形、长形等等。细胞的生长方式有些像鹅卵石铺成的路面、有些呈液涡状、有些是随机形态、而有些则覆盖了另一些细胞。 在单个细胞中能够发现一个比较暗的圆形细胞核，其内还有更暗的核仁。有时核仁大得把细胞质挤成很小的一块。分裂时期细胞核可能成半球状或 …