2022年 5月 17日, 星期二
新闻

细胞培养

如何制备血清减量或无血清培养基?

目前,人们普遍认可单一类型细胞的最合乎生理的培养基是添加了蛋白质的、并且含有适当浓度的各种成分以及细胞外基质组分的限定培养基。 材料 基础营养培养基,如DMEM 营养物质:无机盐,氨基酸,维生素 微量元素 添加剂:生长因子和激素,其他各种培养基成分(见表1)  凭经验先选用特别适合某种细胞生长的培养基,减少未限定培养基成分的浓度,直至细胞增殖能力降低,但活力 …

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细胞污染的心得体会

细胞培养的质量好坏是细胞相关实验的基石,许多朋友都曾经历过因为细胞污染影响实验进度的郁闷,被老板批评是小事,要是影响到正常毕业就是大事了。怎么分辨细胞污染,是不是细胞污染?是那种细胞污染?细胞污染后如何处理? 预防污染 细胞培养是个细致活儿,一不小心就会造成污染,最好养成良好无菌操作习惯。个人经验是,进实验室之前最好洗手,很多实验者都不bother,这是国人 …

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实验室小白篇:细胞培养用的液体

一、细胞培养所需的培养液 在细胞的研究和利用过程中,最主要的是要为细胞提供最适的生长条件,保持细胞培养开始时的群体状态。这就要求培养条件始终如一,近乎呆板地坚守细节和常规,而且细胞培养,试剂昂贵,费时、费力,不是随随便便就可以进行的。 细胞只有在最适生长条件下,才会保持正常的核型及功能。如果培养条件上打折扣,就意味着会出现带有染色体重排或突变变异株细胞。某些 …

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细胞培养常用的抗生素有哪些?

大多数实验室使用抗生素,但是如果无菌操作技术掌握得很好,抗生素其实也不是必需的。多数抗生素在37°C 时的半衰期都很短,培养基内实际的抗生素浓度要比你以为的低。 细胞培养所用的抗生素通常以干粉形式保存,使用前用无菌水或其他溶剂将其溶解,得到的抗生素溶液可以不需要再进行过滤除菌。 细胞培养的两种标准抗生素 庆大霉素,储存液浓度5-10 mg/ml, 工作浓度为 …

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改良的Boyden 小室法观察细胞的的运动性

该方法常用来检测白细胞和巨噬细胞的趋化性,后经改良用于肿瘤细胞运动性、侵袭性等的测定。Boyden 小室由上、下两个室组成,两室中间由带微孔的滤膜分隔,也可用鸡胚尿囊膜、人胚胎羊膜等分隔。待测细胞放在上室, 其运动性通过测量滤膜上层到运动最远的细胞之间的距离而确定。也可以计数在滤膜不同平面上细胞数、滤膜底部的细胞数或是另一张在下室的滤膜上细胞数。当上下两室均 …

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常用的细胞株

持续传代的细胞株有更高的生长速率、克隆效率、成瘤率和更多的染色体组型。 持续传代细胞株经常被改造成所需的独特表型。 细胞株分化度越高,它的生长也就越慢。 常用的细胞株 细胞株 细胞类型和来源 贴壁或悬浮培养 3T3 成纤维细胞(鼠,胚胎) 贴壁培养 BHK21 成纤维细胞(叙利亚仓鼠,肾脏) 悬浮培养 MDCK 上皮细胞(狗,肾脏) 贴壁培养 ES 胚胎干细 …

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体外培养细胞的一般性质(三)

体外培养细胞的能量代谢 体外培养细胞的主要能量来自葡萄糖。大多数培养液含1 g/L (5.55mmol/L)葡萄糖, 近年来含4.5g/L 葡萄糖的高糖培养液(主要是DMEM 和RPMil640 ) 使用得越来越多。这使得细胞增殖更快。葡萄糖主要被细胞用作糖酵解的碳源,以乳酸为终产物。培养细胞中三狻酸循环(也称拧檬酸循环)仍然活跃,氨基酸作为碳源,特别是谷氨 …

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人胚胎肺成纤维细胞的培养

成纤维细胞作为体外最易培养成功的正常细胞,用途广泛。但由于其有限的传代寿命,通常用于细胞衰老的研究,在肿瘤研究中,常常作为正常细胞对照,用于研究细胞恶性转化的条件和影响因素。另外, 它也常用于药物毒性的检测。体外培养的成纤维细胞, 还用于疾病的诊断,如染色体异常疾病的筛选、先天性代谢遗传疾病的细胞化学及生物化学检验和鉴定。 (一)材料与设备 1.设备   超 …

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如何制备含血清的培养基?

进行体外哺乳动物的细胞培养,其要点之一是在培养器皿中营造一种生理环境和特殊细胞类型的特异性反应。液态培养基至少要为细胞提供生长所需的营养物质、能量、恒定的pH 和适当的渗透压。此外,培养的外环境,尤其隔水式CO2培养箱,一定要达到稳定的温度和湿度,以防培养液蒸发,还要供给呼吸所需的O2 和维持培养液中碳酸氢盐缓冲系统的CO2 。目前普遍使用的培养基一般由两部 …

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细胞培养类型的分类:根据生长习性分类

根据细胞在液体或半固体培养基中的生长情况分类,生长特征只是功能上的描述,并与细胞来源有关。 悬浮和贴壁生长是细胞的特性和培养条件,有些细胞可以以两种方式进行。   图1 制备分泌抗特定抗原X 的单克隆抗体的杂交瘤细胞筛选培养基中加入了氨甲啋呤抑制剂,可以抑制核昔酸正常生物合成的药物,所以细胞必须采用其他途径合成核酸,而只有杂交瘤细胞株可以采取这种途径合成核昔 …

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