2024年 2月 23日, 星期五
新闻

细胞培养

如何选择正确的方法进行细胞的支原体检测?

几种支原体检测方法,各有优缺点。各实验室可根据具体情况,选择不同的方法,或几种方法联合使用。 1. 培养法为最为经济可靠的方法,但其实验周期较长,所以常用来进行对怀疑细胞的最后甄别。 2. 荧光指示细胞法较为快捷,方法简单,但其灵敏度有一定的欠缺, 易造成漏检。 3. PCR 法检测支原体的方法最为快速、灵敏、取样量少,既可做细胞本身,也可做细胞上清的检测, …

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贴壁细胞的分瓶操作步骤

1.从细胞单层吸出培养基。2. 缓慢加入37’C 温浴的PBS 或不含血清的培养基,让培养基沿容器壁流下,注意不要滴在细胞上,以免冲掉附着不牢的细胞。3. 再吸出PBS 或培养基。4. 加入含0.25 %胰蛋白酶的PBS, 加入蜇以刚刚没过细胞为宜。5. 立即吸去胰蛋白酶,停留在细胞上的时间为10 ~ 30s(可以用不含血清的旧培养基多洗细胞几次 …

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细胞培养的无菌技术

微生物无处不在,它们造成污染的可能性也处处存在。细胞培养成功操作最基本的要点是:任何与细胞接触的物品必须是无菌的或没有污染的。要解决培养过程中的污染问题是一件繁琐的、令人沮丧的、没有成功把握的工作,因此,最好的策略就是防止微生物污染的发生。 方案 1 无菌技术 无菌技术在理论上是很简单的:阻止无菌的、未被污染的物质或物品与任何有菌的、被污染的物体相接触。成功 …

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视神经星状胶质细胞的培养

随着细胞培养技术的不断改进,虽然正常细胞难于培养成活,科研人员还是不断研究各种正常细胞的培养方法。到目前为止,几乎体内各种组织细胞均可在体外成功培养。越来越多的研究工作可应用体外培养的正常细胞作为模型开展工作。神经胶质细胞的成功培养最早由Raff 等完成。视神经胶质细胞的培养开始于1990 年,先后有多个实验室培养成功。视神经胶质细胞参与眼部多种疾病的发生、 …

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细胞污染的心得体会

细胞培养的质量好坏是细胞相关实验的基石,许多朋友都曾经历过因为细胞污染影响实验进度的郁闷,被老板批评是小事,要是影响到正常毕业就是大事了。怎么分辨细胞污染,是不是细胞污染?是那种细胞污染?细胞污染后如何处理? 预防污染 细胞培养是个细致活儿,一不小心就会造成污染,最好养成良好无菌操作习惯。个人经验是,进实验室之前最好洗手,很多实验者都不bother,这是国人 …

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如何制备含血清的培养基?

进行体外哺乳动物的细胞培养,其要点之一是在培养器皿中营造一种生理环境和特殊细胞类型的特异性反应。液态培养基至少要为细胞提供生长所需的营养物质、能量、恒定的pH 和适当的渗透压。此外,培养的外环境,尤其隔水式CO2培养箱,一定要达到稳定的温度和湿度,以防培养液蒸发,还要供给呼吸所需的O2 和维持培养液中碳酸氢盐缓冲系统的CO2 。目前普遍使用的培养基一般由两部 …

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新生大鼠骨骼肌细胞原代培养及肌管诱导分化

从新生大鼠的骨骼肌中分离成肌细胞(卫星细胞),在体外培养条件下,成肌细胞在培养底物上增殖,在诱导分化条件下,可迁移成直线排列,最终融合形成多细胞肌管。已有报道,将自体的骨骼肌细胞移植入心肌梗死后的瘢痕可改善心肌功能。这些进展激发了科研人员对体外成肌细胞增殖、分化分子机制的基础研究。下面将介绍新生大鼠骨骼肌细胞的原代培养及肌管诱导分化。该方法也可用于小鼠、兔、 …

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细胞培养类型的分类:根据来源分类

根据来源分类 原代细胞分离于动物或植物的组织,经培养获得。细胞一旦分裂就成为有限传代细胞株,并且有可能变成无性增殖化细胞。把正常细胞来源的有限传代细胞株持续传代,筛选出快速生长的细胞,就有可能把有限传代细胞祩转变成持续传代的细胞株,这个操作就是自然转化。   来源   与组织相溶性 维护 加倍 原代细胞 动物组织、胚胎或成体 典型 难 0 …

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如何观察细胞?

培养细胞后,要时刻观察我们的细胞,无论是用眼睛还是显微镜观察,我们要了解他们的状态,每个实验的培养条件不同,只有时刻了解他们,及时调整,才能做好后续实验。 划重点: 必须熟悉培养的细胞的正常形态,每当拿到一个新的细胞株时,要尽可能多的观察并熟悉细胞的正常生长情况。 当我们从培养箱中拿出细胞培养瓶时: 1.注意看培养基的颜色。多数培养基中都有酸碱指示剂,偏酸性 …

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