本方案描述了将ASO 转入果蝇S2 细胞以便抑制miRNA 功能的方法。通过检测miRNA靶蛋白水平或miRNA 靶基因3UTR 报道基因的活性,可以检测ASO 对miRNA 的效应。本方案是针对24 孔板设计的,若用其他多孔板、培养瓶或不同直径培养皿,应根据其表面积计算细胞密度和试剂体积 。 试剂 ASO ( 12.5μmol/L ) 和错配和/或无关对照 …
阅读更多 »Real-time qPCR实验设计—-从开始到结束
实验设计其实比实验本身更重要!!好的实验设计可以事半功倍,节省时间节省时间!!尤其做生物实验,一定要查询尽可能完全的相关资料,整理好思路,设计好实验路线。当然实验过程中出现各种各样的变化,但有足够多的背景知识,就可以分析原因,才有可能创新。 一、 对于一个real-time qPCR而言,首先就是实验材料的处理和料;然后引物设计,这步至关重要,好的引物是实验 …
阅读更多 »Experimental immunology | 西安交通大学医学院:是什么在助长红斑狼疮?
研究人员在最新的研究中表明:lncRNA MIAT 通过体内降解miR-222来上调 CFHR5 表达,增强狼疮疾病的活动,并在《Experimental immunology》期刊上发表了题为 “LncRNA MIAT enhances systemic lupus erythematosus …
阅读更多 »European Journal of Pharmacology | 复旦大学医学院:发现乳腺癌发展的新秘密
《European Journal of Pharmacology》期刊上最新发表的乳腺癌相关文章“SPTBN1 inhibits growth and epithelial-mesenchymal transition in breast cancer by downregulating miR-21“表明低水平的SPTBN1与乳腺癌的肿瘤生长 …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 海军医科大学王文忠教授团队报道:改善高血压氧化应激的新策略
王文忠教授团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了“β-Arrestin1 Reduces Oxidative Stress via Nrf2 Activation in the Rostral Ventrolateral Medulla in Hypertension”论文,研究结果证实b-arrestin1 的过表 …
阅读更多 »CANCER IMMUNOLOGY IMMUNOTHERAPY | 四川大学口腔医院:一种诱导口腔鳞状细胞癌恶化的信号通路
四川大学口腔医院发表在《CANCER IMMUNOLOGY IMMUNOTHERAPY》期刊上题为“OSCC cell‑secreted exosomal CMTM6 induced M2‑like macrophages polarization via ERK1/2 signaling pathway”的文章涉及了一种新的体内转染方法 …
阅读更多 »在哺乳动物细胞中通过反义寡核苷酸抑制miRNA 功能
向哺乳动物细胞内转染反义寡核苷酸从而抑制miRNA 功能的具体方法参照本方案。通过检测miRNA 靶蛋白水平或携带miRNA 靶基因的3’端非翻译区( 3UTR ) 报道基因的活性来检测ASO 对于miRNA 的效应。本方案主要针对24 孔板设计,如果用其他多孔板、细胞瓶或不同直径培养皿培养细胞,需根据孔/瓶表面积计算细胞密度和试剂体积 试剂 A …
阅读更多 »Experimental Neurology | circle RNA重庆医科大学钟建军教授团队报道:调控疾病的新方向
钟建军教授团队在《Experimental Neurology》期刊上发表的“Significant changes in circular RNA in the mouse cerebral cortex around an injury site after traumatic brain injury”文章通过携带siRNA的体内转染试 …
阅读更多 »Theranostics | 复旦大学儿童医院报道:揭开I型糖尿病的发病机制
该团队在《Theranostics》期刊上发表了题为“Circular RNA circPPM1F modulates M1 macrophage activation and pancreatic islet inflammation in type 1 diabetes mellitus”的论文。实验将circular RNA 通过体内转染 …
阅读更多 »RNAi、miRNA及siRNA的区别和联系
RNA干扰 (RNAi):近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。 MicroRNA(miRNA,微RNA): …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享