英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

SIRT3是NAD+依赖性的线粒体蛋白脱乙酰酶，参与调节中枢代谢和线粒体蛋白稳定。SIRT3在肾透明细胞癌（CCRCC）中被下调，这是肾癌的最常见形式。尽管ccRCC具有典型的Warburg样表型、线粒体功能障碍和脂肪沉积增高的特征，但SIRT3是否参与肿瘤的发生和发展尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与siRT3过表达抑制肾肿瘤细胞生长研究 …

最常见的卵巢癌是上皮性癌，其中致癌的病因仍然是?以捉摸的。ANO1/TMEM16A是Ca2+激活的Cl-通道（CACS）的成员，已证实其可以促进上皮性癌的发生，然而其是否在卵巢癌的发病机制中发挥作用尚不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与ANO1通道和卵巢癌研究的文献，以供参考。

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …

1.细胞密度 一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 还有，尽量选择无支原体污染的 …