英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

       我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loading …

      动脉粥样硬化（AS）是一种进行性的血管疾病，其特征是大动脉内膜和管腔内脂质积聚、炎症、动脉粥样硬化性斑块形成和纤维化，是冠心病的主要原因，并导致心肌梗死。有效的抗AS药物目前在临床上还很少见。因此，迫切需要开发新的抗AS药物，以减少AS的并发症。现分享一篇ECL发光液（enlight）与hexarelin来减轻动脉粥样硬化研究的文献，以供参考。 …

      家蚕是世界上最重要的经济昆虫，也是鳞翅目重要的模式生物。家蚕丝腺是一种高度特异性，具有高效合成丝蛋白能力的特殊器官。丝蛋白主要由丝素和丝氨酸组成。丝素基因的表达主要在转录水平上受到时间和空间调控，表现为表达抑制模式。研究表明家蚕miRNAs参与丝蛋白基因的表达调控。另外，家蚕丝腺特异性转录因子（Tfs）如丝腺因子（SGF，包括SGF-1、SGF- …

可能有多种原因： 目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡； 转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害； 细胞贴壁转染之后没有正常换液。 建议： 考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统； 摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试Entranster等毒性较小的转染试剂。 对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够 …