英格恩技术资料

首先siRNA由于只有二十几个碱基对，相比DNA几千上万对碱基，小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA，而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。其次，siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的结果，这对于过量表达的DNA转染来 …

       CCK8溶液自身因为高浓度的PMS的存在而具有一点毒性。但是，加到培养基中的CCK8是没有毒性的，因为被稀释了10倍。因此，长时间的培养，如过夜或者培养数天是可以的。同一个细胞培养液在CCK8检测后还可以用于其他细胞增殖检测，如结晶紫检测，中性红检测或者DNA荧光检测等。由于每种细胞对于CCK8的耐受力都不同，因此在需要进行长时间培养时，先检测 …

这种情况可能是由多种因素引起的，以下是一些可能的原因： 转录水平和蛋白水平的不同调控机制：虽然shRNA能够有效地降低目标基因的mRNA和蛋白表达，但有时候蛋白质的功能并不完全依赖于其表达量。有可能是基因表达抑制后，细胞通过一些补偿机制（比如其他途径的上调或活化）来恢复其功能，导致表型不一致。 shRNA的特异性和脱靶效应：shRNA可能会靶向与目标基因相似 …

       RAS级联的异常激活在人类肝细胞癌（HCC）中普遍存在，与ras的罕见突变无关。然而，在肝癌发生过程中，ras级联与肝脂肪变性的关系仍在研究中。现分享一篇ECL发光液（enlight）与饮食诱导的肝脂肪变性通过CPT1α激活ras促进肝癌发生研究的文献，以供参考。

吸烟是导致动脉粥样硬化的重要危险因素之一，可引起血管内皮损伤。同时，脂肪细胞是血管周围脂肪组织（PVAT）的主要细胞类型。PVAT是最大的内分泌和旁分泌器官，解剖学中直接与外模连接，这可能对血管内皮细胞损伤中发挥关键作用。现分享一篇ECL发光液（enlight）与脂肪细胞、尼古丁和内皮细胞损伤研究的文献，以供参考。

1.用于慢病毒感染的细胞接种量是多少？ 根据细胞增殖的速度调整细胞接种量，以保证在感染后4天左右细胞刚好快长满培养皿底部为宜。 针对大部分细胞系：传代周期在2-3天，感染时细胞铺板的密度保持在20-30%左右，则72h后细胞增殖后铺板密度约在90%左右； 针对某些原代细胞： 由于细胞增长缓慢，可以在接种时提高汇合度到50%～60%，但要确保在感染后4天时细胞 …

RNA转染效率低，可能的原因： 1. 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster。 2. 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 3.检测时间有问题。适当调整检测时间。 4. RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 5. 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。

       P-糖蛋白 (P-gp) 是ABC (ATP binding cassette)转体家族重要成员, 也是药物在机体内转运的重要载体, 参与药物代谢动力学过程并介导了临床上许多药物相互作用。P-gp 是在正常组织分布广泛的血浆膜结合药物外排转运蛋白, 存在于肠道上皮、肾小管、肝小管、血脑屏障和胎盘屏障。P-gp 主要表达在上皮细胞内腔侧表面、顶端 …

       该团队在《Journal of Cell Science》期刊上发表了题为“HMGB2 regulates satellite cell-mediated skeletal muscle regeneration via IGF2BP2”的论文。文章通过体内转染试剂（EntransterTM -in vivo, Engreen）获取的数据突出了 …

可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …