在避光条件下CCK8 试剂在4℃可保存一年。如果需要保存较长时间的话,推荐在-20℃下保存。但是CCK8若反复解冻和冰冻将会增加空白吸收,从而影响检测结果,若经常使用可将试剂存放在4℃冰箱内保存。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA …
阅读更多 »慢病毒载体构建原理
慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成,即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白;载体成分则与包装成分互补,即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列,同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转染包装 …
阅读更多 »RNA转染与LncRNA SNHG12对胃癌细胞BGC-823增殖的影响研究
胃癌是一种常见的上皮性癌,是世界范围内最常见的第五种恶性肿瘤。近年来胃癌的发病率一直呈上升趋势。每年约有一百万例胃癌发生,其中东亚地区占到50%,尤其是中国,严重危害人民健康和生命。中国胃癌的年发病率约为400000,占全世界病例总数的42%,并且总死亡率逐年上升。因此,寻找可靠的胃癌标志物和靶点是至关重要的 …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与小鼠慢性气道炎症研究
哮喘是一种常见的慢性呼吸道炎症性疾病其特点是喘息,气促、胸闷、咳嗽,以及呼气气流受限。研究认为哮喘是一种异质性疾病,具有不同的发病机制。淫羊藿甙是从淫羊藿中分离的一种黄酮苷,已报道具有抗骨质疏松、抗炎和抗抑郁的功能。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与淫羊藿苷对哮喘小鼠慢性气道炎症的抑制作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »做慢病毒感染实验前,你需要哪些知识储备?
慢病毒载体的构建: 慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成,即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白;载体成分则与包装成分互补,即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列,同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转 …
阅读更多 »siRNA答疑专题总结(上)
Q1:如果慢病毒载体中没有抗性标记,只有GFP,请问还能筛选稳转的细胞传代培养吗? A1:采用流式分选是流式细胞仪的一个功能,有流式细胞仪就可以了。一般实验室对流式都有专门的人员操作,不需要自己动手。由于没有抗性,需要注意分选过程的无菌操作。 Q2:RNA干扰如果用慢病毒做稳转的细胞株,什么样的目的RNA都可以用来干扰来做稳转的细胞株吗,目的RNA所编码蛋白 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与Clock基因突变体通过抑制NFKB的乙酰化来促进骨关节炎研究
地球上生物的生理活动维持着大约24小时的昼夜节律,这是由核心昼夜节律基因家族调控的。核心昼夜节律钟由许多调节因子组成,如时钟和bmal1,它们形成一个异二聚体,并有助于下游基因的激活。或者,一些调节因子(如per/cry)通过抑制时钟/bmal1活性来调节昼夜节律。这种转录翻译反馈是由核心昼夜节律分子介导的,并产生昼夜节律。现分享一篇体内转染(entrans …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与人单核细胞来源的树突状细胞的染色质状态调控研究
树突状细胞(DCS)是抗原(Ag)呈递细胞,具有独特的刺激幼T细胞和启动原发性免疫应答的能力。然而,DCs在中枢和外周免疫耐受的诱导和T细胞免疫应答的类型的调节中也具有关键性的作用。依赖于环境,树突状细胞(DCS)可能变得活跃或耐受性,但很少知道是否遗传的表观遗传修饰涉及这些过程。现分享一篇RNA转染(Entranster)与人单核细胞来源的树突状细胞的染色 …
阅读更多 »DNA转染实验中的关键点
1)优化条件:质粒不同,所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外,可选用更合适的转染试剂,如Entranster试剂。 2)抑制剂:不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素,EDTA,柠檬酸盐,磷酸盐,RPMI,硫酸软骨素,透明质酸,硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
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