2025年 12 月 14日, 星期日
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英格恩技术资料

如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等(非小鼠)动物的体内基因敲除/表达?

如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等动物的基因敲除呢? 如果实验室研究人体疾病基因,需要稳定表达时,我们可能会选择基因工程小鼠,但如果课题组研究的是其他哺乳动物,比如猪、蝗虫、鱼之类的,基因工程的工作就相对复杂了。首先要设计基因载体,然后打入靶细胞进行同源重组,再培养细胞、筛选……一套工夫下来,要不目的基因没重组,要不模型全死了。要不找公司做?老牌的公司构建基因工 …

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悬浮细胞的siRNA转染实验步骤

悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …

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体内转染(Entranster)与中性粒细胞气道炎症研究

       吸入糖皮质激素,主要是皮质类固醇,目前治疗哮喘最有效的方法。然而,这种疗法去无法阻止重症哮喘或者顽固性哮喘的发展,被称作是非嗜酸细胞性哮喘(NEA)。NEA的特点是中性粒细胞(PMN)数目增加,并伴有单核细胞/巨噬细胞、肥大细胞和淋巴细胞相关的炎症反应。现分享一篇体内转染(Entranster-in vivo)与中性粒细胞气道炎症研究的文献,以 …

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动物体内转染,局部注射后应如何取样?

         使用动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行体内转染实验时,由于局部注射容易造成药液分布不均,在注射的近端,药液浓度高,效果明细;远端,药液浓度低,效果低一些。所以,一方面,需要尽量将药液均匀覆盖全部靶组织,另一方面,后续实验取样时,在保证实验的 …

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ECL发光液(Enlight)与黍稷中纯化的阳离子过氧化物酶可诱导人结肠癌细胞程序性坏死研究

由于细胞通过不同的凋亡方式进行程序性死亡,抗凋亡剂的癌细胞可能会对程序性坏死的诱导剂敏感。许多传统的被批准进入市场或者临床试验的化疗或分子靶向药物被确定为某些癌细胞的程序性坏死的诱导剂。这些药物包括紫草素及其类似物,β-拉帕醌和eupomatenoid-5等。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与黍稷中纯化的阳离子过氧化物酶可诱导人结肠癌细胞程序性坏死研 …

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慢病毒感染后,细胞不生长原因?

慢病毒感染后,细胞不生长可能有多种原因。 以下是一些常见的原因和解决方法: 1) 病毒滴度过高: 原因:高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性,使细胞无法正常生长。 解决方法:降低病毒的滴度,进行一系列稀释实验,找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度。 2) 细胞状态不佳: 原因:感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。 解决方法:确保细胞在最佳状态下进行感染 …

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