余剑波教授团队在《Oxidative Medicine and Cellular Longevity》期刊发表了题为“Hydromorphone Protects against CO2 Pneumoperitoneum-Induced Lung Injury via Heme Oxygenase-1-Regulated Mitochondri …
阅读更多 »慢病毒滴度较低，通常需要较高的 MOI（如 20）才能有效感染，而正常病毒滴度较高，合适的 MOI 可能为 0.1。要将两者放在一起进行比较，可能需要考虑以下因素： 实验目的： 如果关注的是相同数量的感染细胞，可以根据感染效率调整 MOI，以保证相似的感染率。 如果关注的是病毒自身的感染特性，可能需要分别选择最佳 MOI 进行单独实验，再综合分析。 病毒载量 …
阅读更多 »荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光，但有几点需要注意： 细胞存活率：冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好，具有正常的形态和活力。 荧光稳定性：荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。确保荧光信号在解冻后仍然足够强且稳定。 冻存条件：使用适当的冻存保护剂（如DMSO）并在-80°C或液氮中冻存，以尽量减 …
阅读更多 »慢病毒感染后未能实现敲降的原因可能有多种。以下是一些可能的原因及其解释： 慢病毒包装质量问题： 病毒滴度较低，导致感染效率不高，可能无法有效转导目标细胞。 病毒颗粒中没有足够的有效载体，影响敲降效果。 靶向序列设计问题： shRNA或sgRNA设计不合理，没有有效靶向目标基因的序列。 目标序列与基因组其他部位的相似性导致脱靶效应，影响敲降效果。 感染条件不佳 …
阅读更多 »标题：Histidine-rich glycoprotein modulates neutrophils and thrombolysis-associated hemorrhagic transformation 影响因子：13.547 期刊：EMBO Molecular Medicine 发表时间：2024年8月15日 实验背景 该研究探讨了富含组氨酸的 …
阅读更多 »回答：“无抗的都长满”，说明细胞活性和数量没问题，基本排除培养条件问题。那么核心矛盾集中在质粒是否成功进入细胞并表达抗性基因。这里有几个关键排查点：质粒浓度是否足够（建议>100ng/μL）、抗性基因是否匹配（如氨苄不能用于表达AmpR的质粒）、抗性板浓度是否正确（过高会杀死阳性克隆）。 特别注意的是检查质粒纯度。实验室常用乙醇沉淀法提质粒，但残留的盐 …
阅读更多 »可从以下几方面进行优化： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如 …
阅读更多 »冠状动脉阻塞继发心肌缺血（MI）是一种严重的心脏病，发病率和死亡率都很高。交感传入通路是心肌梗死信号传导的关键。背根神经节（DRG）神经元的感觉输入在控制交感神经输出到心脏的过程中起着重要作用。 心肌缺血可激活交感传入神经末梢，常伴有血压升高和交感传出兴奋，引起交感兴奋反射。冠状动脉闭塞模型还通过激活缺血左心室的感觉神经末梢来诱导交感神经反射。交感 …
阅读更多 »L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是。现分享一篇运用siRNA转染（entranster …
阅读更多 »外伤性脊髓损伤（T-SCI）是世界范围内常见的一种损伤，常导致严重的神经功能缺损和渐进性退化。T-SCI的病理是原发性损伤和继发性损伤的结果。原发性损伤指的是直接导致脊髓结构损伤，包括细胞死亡、局部轴索损伤、血管破裂以及损伤部位周围的局灶性出血。继发性损伤是由原发性损伤引起的各种分子、细胞和生化反应引起的 …
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