为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与信号素3A导致创伤性脑损伤后继发性血脑屏障损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是一种危害人类健康的高发病率疾病,随着社会的发展,这种疾病的发病率有上升的趋势。脑外伤死亡率为10.8%,致残率为12%。脑外伤已成为40岁以下人群的第五大死因,年轻人约占脑外伤患者的70%。信号素3A(SEMA 3A)是信号素家族的成员,是一类参与神经网络构建的膜相关蛋白。SEMA3A曾被报道可影响血管通透性,但其在创伤性脑损伤(TB …
阅读更多 »Frontiers in Neuroscience | 中国医科大学报道:谁在保护我们的脊椎神经?
该团队在《Frontiers in Neuroscience》期刊上发表了题为“MiR-128-3p Alleviates Spinal Cord Ischemia/Reperfusion Injury Associated Neuroinflammation and Cellular Apoptosis via SP1 Suppression …
阅读更多 »体内转染与CLU4A的抑制缺氧/复氧损伤中的心脏保护作用研究
CLU4A在各种人类癌症中被鉴定为原癌基因。CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中表达上调,但CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中的确切作用尚不清楚,需要研究CLU4A在心肌缺血/再灌注损伤中的潜在机制。现分享一篇体内转染(engreen)与CLU4A的抑制缺氧/复氧损伤中的心脏保护作用研究的文献,以供参考。 文 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与神经炎症和创伤性脑损伤研究
创伤性脑损伤(TBI)是导致儿童很成年人死亡和残疾的主要原因之一。被称为重要的继发性损伤机制的神经炎症在TBI引起中枢神经系统损害的过程中发挥有害或有益的作用。然而,持续和过度的炎症会加重TBI后神经元细胞凋亡。现分享一篇体内转染(Entranster)与神经炎症和创伤性脑损伤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与HNRNPC在乳腺癌细胞中作用研究
在胶质母细胞瘤、肝细胞癌、黑色素瘤和肺癌等多种肿瘤或肿瘤细胞系中,均可观察到异质核糖核蛋白C(HNRNPC)的异常上调。HNRNPC以其在RNA剪接、序列非特异性RNA输出、RNA表达、稳定性、30端加工和翻译中的调节作用而闻名。的确,在这些涉及HNRNPC的调节事件中,涉及多种癌症相关基因的处理,包括BRCA、uPAR、MALAT1、PDCD4、cMyc。 …
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体的构建与鉴定研究
Nemo样激酶(nemo-likekinase,NLK)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在NLK的同源蛋白,其结构存在高度的相似性,显示NLK在进化过程中十分保守。研究显示,NLK能够结合并磷酸化一系列转录因子,参与多个信号通路的调节,其中包括与发育过程密切相关的信号途径Wnt和Notch等。Kortenjann等研究发现,NL …
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与弓形虫疫苗研究
弓形虫是一种无处不在的原生动物寄生虫,能感染所有恒温动物,包括哺乳动物和鸟类。蛋白质二硫键异构酶(PDI)可以移位到弓形虫速殖子细胞表面,参与调解病原微生物和宿主细胞的相互作用。现分享一篇ECL发光液(Enlight)在弓形虫疫苗研究中应用的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么?
RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »一个抑制脑中风的miRNA
MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码小RNA,miRNAs能结合到靶基因mRNA的3’非翻译区诱导转录退化和/或抑制翻译。miRNA在多种病理生理过程中发挥着重要的作用。 Let-7c是最丰富且高度保守的miRNA。以往的研究表明,let-7c通过调节细胞增殖和细胞凋亡抑制癌细胞存活率。最近研究表明Let-7c是巨噬细胞极化的重要调节器。 Let- …
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