英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
脓毒症是一种危及生命的疾病，其特征是器官功能不全。脓毒症被广泛认为是由于感染引起的代偿性抗炎反应和全身炎症反应之间的平衡不稳定。在严重的情况下，炎症、脓毒症可导致急性肺损伤（ALI），更严重地可能会发生急性呼吸窘迫综合征（ARDS）。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与丹酚酸B和脓 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制研究
丹参酮 IIA（Tanshinone IIA，Tan IIA）是一种从丹参干根中提取的生物活性物质，具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而，Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染（Entranster）的方法的文献，通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制，以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA（siRNA）是通过RNA干扰（RNAi）在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具，由于RNAi利用天然途径，即在蛋白质翻译发生之前，在转录后水平上关闭基因表达，因此，siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送和药代动力学性质。现分享一篇体内转染（Entran …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与蓝光照射和视网膜神经节细胞死亡研究
蓝光（420～490 nm）是可见光的主要成分，具有较高的到达视网膜的能量。一些流行病学研究表明，暴露在阳光中，即使在普通的日常强度下，也有助于老年性黄斑变性和视力丧失的进展。大量的研究明确地表明蓝光可以导致视网膜细胞感光细胞和视网膜色素上皮细胞（RPE）的损伤。此外，视网膜神经节细胞（RGCs）的丢失被发 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与急性髓系白血病细胞系U937研究
白血病是儿童和青年常见的造血系统恶性肿瘤之一。急性髓系白血病（AML）主要由造血系统中原始骨髓细胞恶性集落增殖所引起，其特征是骨髓母细胞异常增殖和抑制正常造血细胞的生长。尽管造血干细胞移植和一些新药的出现对AML有一定的治疗作用，但除了急性早幼粒细胞白血病外，对于其他类型的AML仍然没有可治愈的治疗。因此，寻 …
阅读更多 »siRNA转染答疑专题总结（下）
Q9: 刚开始做实验，准备把RNAi的片段转入染色体内稳定表达，不知道是shRNA还是siRNA哪个比较好而且效率比较高？另外，一个载体里同时放两个针对不同基因的shRNA会不会相互影响？ A9: 稳定转染当然是shRNA。关于一个载体2个shRNA，涉及到2个shRNA的表达和加工的问题，关键还是2个shRNA都需要顺利表达的问题，这就和你的载体，以及2个 …
阅读更多 »动物体内转染注射技巧
尾静脉注射时请掌握注射技巧，一般选用远端1/3 处静脉注射，如感觉到阻力和轻微隆起，请停止注射，重新寻找静脉进行操作，不要强力推注，否则容易将药液注射在尾部，导致尾部溃烂。注射完成后移去针头，按压针孔10 秒以上，防止药液流出。局部注射，尽可能多注射药液，有利于提高转染效果 …
阅读更多 »什么是腺病毒载体？
腺病毒属于腺病毒科，分为两个属：禽腺病毒属（鸟腺病毒）和哺乳动物腺病毒属（人、猴、牛、马、猪、羊、犬和负鼠腺病毒）。这些病毒均携带一个线性双链DNA 基因组，由直径为70~100mm 的二十面体衣壳蛋白包裹。约36kb 的基因组包括4 个提供调控和复制功能的早期转录单位(El 、E2 、E3 、E4) 、2 个延迟早期单位(IX 和IVa2)和1 个指导包括 …
阅读更多 »siRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »ECL发光液与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征，即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病（AD）进展，是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子（CNTF）不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活，还可显著降低淀粉样蛋白β（Aβ）聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液（enlight）与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献， …
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