ECL发光灵敏度越高越好吗? A: 不是。大多数实验的蛋白浓度在pg-ng级别,用增强型的发光液就可以。比如英格恩的Enlight发光液。 2.ECL发光液为什么需要避光保存? A:因为ECL发光液里的鲁米那等发光成分很容易因为光而失活,所以需要避光保存。 3.ECL发光液多长时间容易失效,用一瓶ECL试剂,结果有差异,是否是失效了? A:早期的ECL发光也 …
阅读更多 »ECL发光液与蛋白激酶Nemo样激酶基因重组腺病毒载体构建研究
Nemo样激酶(nemo-likekinase,NLK)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。在果蝇、线虫、爪蟾等多种生物中都存在NLK的同源蛋白,其结构存在高度的相似性,显示NLK在进化过程中十分保守。研究显示,NLK能够结合并磷酸化一系列转录因子,参与多个信号通路的调节,其中包括与发育过程密切相关的信号途径Wn …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与P2Y12 shRNA减轻2型糖尿病大鼠神经病理性疼痛研究
糖尿病性神经病理性疼痛是2型糖尿病(DM)的常见并发症。背根神经节(DRG)中星形胶质细胞(SGCs)的激活通过释放促炎细胞因子在神经病理性疼痛中发挥重要作用。P2Y12受体在DRG的SGCS中表达。现分享一篇体内转染(Entranster)与P2Y12 shRNA减轻2型糖尿病大鼠神经病理性疼痛研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心肌损伤中的作用研究
冠状动脉微栓塞(CME)是急性心肌梗死(AMI)急诊经皮冠状动脉介入治疗的常见并发症,发生率为15%~20%。它可以直接导致“无血流”或“血流缓慢”。它是AMI患者长期预后不良和主要心脏不良事件的独立预测因子。研究表明,CME引起的局部心肌炎症是导致进行性心功能不全的主要原因。现分享一篇体内转染(Entranster)与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心 …
阅读更多 »细胞RNA转染实验注意事项
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与壳聚糖微球三维局部给药系统制备多孔脱蛋白牛骨支架研究
越来越多的骨缺损患者需要骨移植。然而,骨移植,骨缺损的金标准,承担相当大的风险;供体部位疼痛和发病率,感染,增加失血,以及更长的操作时间。最常见的选择是使用人体尸体骨(同种异体骨),它有额外的缺点,包括排斥反应,有限的供应,以及潜在的疾病传播。因此,生理和化学性质与自体骨相似的动物骨(异种移植物)成为兴趣的焦点。但免疫原性和疾病传播的固有并发症也阻碍了该方法 …
阅读更多 »RNA转染与B细胞成熟抗原和多发性骨髓瘤细胞存活研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BCMA)是BAFF …
阅读更多 »RNA转染与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究
调节性T(Treg)细胞亚群及其特异性转录Foxp3是通过控制效应器T(Teff)细胞反应维持免疫稳态的独特细胞类型。尽管有Treg/teff紊乱的Treg细胞中的缺陷通常会导致自身免疫性疾病,但其确切机制尚未完全揭示。现分享一篇RNA转染(entranster)与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究的文献,以供参考。 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与大鼠早期脑损伤诱导的神经元凋亡研究
早期脑损伤(EBI)诱导的神经元凋亡是导致动脉瘤性蛛网膜下腔出血(ASAH)并发症的主要诱因,并可能会增加ASAH患者的死亡率。c-jun N-末端激酶(JNK)已被证实是EBI诱导的细胞凋亡的启动子,然而其机制尚未完全阐明。现分享一篇体内转染(entranster)与大鼠早期脑损伤诱导的神经元凋亡研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
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