试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水) 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶(75cm2) 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天,通过胰酶消化释放贴 …
阅读更多 »进化保守增强子驱动肌肉再生研究
文献标题 *The Evolutionarily Conserved TPM1 Super-Enhancer Drives Skeletal Muscle Regeneration via Mechanotransduction Signaling* (进化保守的TPM1超级增强子通过机械传导信号驱动骨骼肌再生) 影响因子 本论文发表在 Advanced S …
阅读更多 »ECL发光液与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究
吸烟是一种不健康的生活习惯。糖尿病是多因素的,与环境因素和生活方式有关。值得注意的是,糖尿病似乎受到吸烟的严重影响,包括稳态模型评估在内的临床流行病学调查表明吸烟可能会干扰血糖平衡,但吸烟对高血糖和β细胞的作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与褪黑激素降低吸烟引起的高血糖研究的文献,以 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与镰刀菌细胞毒性研究
在自然界中,微生物镰刀菌病原体普遍侵入宿主植物、动物和人类,并且共生次生代谢物真菌毒素。除农业经济损失外,以脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)为例,这些物质通常是对食品安全、动物和人类健康带来严重威胁。虽然全世界对食品中DON阈值的许多规定都是严格立法的,但DON对婴儿、青年和老年人群的毒性和安全限度仍存在相当大的争议,这实际上是由于对DON毒 …
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关,这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性,有丝分裂纺锤体由精细的机制组装,并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是,中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成,但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染(Entranster)与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
阅读更多 »miR-200b抑制肾细胞癌转移及靶基因研究
标题: MicroRNA-200b is downregulated and suppresses metastasis by targeting LAMA4 in renal cell carcinoma 期刊: EBioMedicine 影响因子: 6.68 研究背景: 肾细胞癌(RCC)的转移是导致患者死亡的主要原因。本研究旨在探索与RCC转移相关的m …
阅读更多 »哪种RNA转染试剂效果更好? Turbofect or EntransterTM-R4000?
近期,上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofect transfection reagent(Thermo)和 EntransterTM-R4000(Engreen)进行了一次RNA转染比较。比较情况如下: 实验方法 转染试剂:Turbofect transfection reagent(Thermo)和 EntransterTM-R4 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因
siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
阅读更多 »病毒包装方法的突破,让众多实验室一周内发表高分文章
传统上,要在动物进行基因、蛋白水平的相关研究,需要通过慢病毒、腺病毒等的介导或者转基因动物(基因敲除动物)进行。前者需要将相关基因克隆,包装到病毒中,通过病毒感染的方法将基因转到动物体内表达,后者需要特别培育相关动物。 这2种方法都面临方法过程复杂,周期长,花费昂贵的特点,这其实阻碍了很多研究的深入,很多实验室甚至大实验室面临动物研究的这些问题都止步不前,从 …
阅读更多 »RNA转染与MDSC细胞和原发性干燥综合征研究
原发性干燥综合征(PSS)是一种全身性自身免疫性疾病。以外分泌腺的淋巴细胞浸润为特征的,主要是唾液腺和泪腺,导致分泌功能的丧失。虽然PSS的病因仍不清楚,但许多研究已经证实树突状细胞(DCS)、NK细胞、B细胞和T细胞参与了SS的发病机制。最近的研究发现,Th1和Th17免疫应答在PSS的发展中起着关键性的作用。髓系来源的抑制性细胞(MDSC)是具有免疫抑制 …
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