慢病毒属于反转录病毒科,与该科其他病毒一样,病毒粒子携带ssRNA, 必须反转录并整合至宿主细胞基因组(原病毒)产生有效感染。慢病毒的显著特点是其基因组复杂、圆柱形或圆锥形的核衣壳携带病毒基因组。核衣壳被携带包膜糖蛋白的双层膜包裹,包膜糖蛋白负责与细胞表面受体进行相互作用及进入宿主细胞。反转录病毒是几乎所有脊椎动物的主要病原体。人类免疫缺陷病毒l 型(HIV …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与杜鹃花总黄酮对心肌缺血/再灌注损伤保护作用及其机制研究
杜鹃花总黄酮(TFR)是从杜鹃花中提取的有效部分,对家兔和大鼠脑缺血和心肌损伤有明显的保护作用。然而,它们的心肌保护机制尚不清楚。 现分享一篇体内转染(Entranster)与杜鹃花总黄酮对心肌缺血/再灌注损伤保护作用及其机制研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染(Entranster)与大鼠创伤性脊髓损伤后神经细胞凋亡和行为恢复研究
外伤性脊髓损伤(T-SCI)是世界范围内常见的一种损伤,常导致严重的神经功能缺损和渐进性退化。T-SCI的病理是原发性损伤和继发性损伤的结果。原发性损伤指的是直接导致脊髓结构损伤,包括细胞死亡、局部轴索损伤、血管破裂以及损伤部位周围的局灶性出血。继发性损伤是由原发性损伤引起的各种分子、细胞和生化反应引起的损伤。现分享一篇体内转染(Entranster)与大鼠 …
阅读更多 »慢病毒浓缩纯化的方法有哪些?
慢病毒纯化工艺,依据其纯化原理主要分为超速离心、密度梯度离心、PEG离心、超滤、切向流、离子交换层析等方法。当前主要的慢病毒纯化均是由上述中的一种或几种方法组合在一起完成。 对于大部分的细胞感染以及普通的动物实验来说,推荐使用超速离心方法对慢病毒进行浓缩。超滤过程中留下的细胞碎片会导致细胞毒性,直接影响病毒的应用。 病毒上清/粗纯病毒 科研级慢病毒 科研 …
阅读更多 »慢病毒感染,胶体金测出来很高,可感染效果很差的原因
慢病毒感染效率低,尽管用胶体金测试显示滴度很高,可能有以下几个原因: 病毒颗粒质量:虽然胶体金检测显示病毒滴度很高,但这并不意味着所有的病毒颗粒都是功能性的。有可能病毒颗粒已经失活或者结构受损,无法有效感染目标细胞。 病毒浓度与效价的差异:胶体金检测主要测量病毒颗粒的数量,但这些颗粒不一定都具有感染性。有效感染的病毒颗粒(感染性单位)可能比实际检测的数量要低 …
阅读更多 »siRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(OE-MSCs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应,包括调节性T细胞(Treg)的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,IL-17在胶原诱导性关节炎(CIA)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »DNA转染与人IL-37b 基因真核表达载体的构建与表达研究
IL-37基因位于人类第二号染色体上,共有五种不同的剪切亚型,即IL-37a ~e,其中IL-37b 是五种亚型中分子量最大的一个 。IL-37 具有广泛的炎症抑制作用,可抑制外周血单个核细胞、树突状细胞、巨噬细胞及上皮细胞等细胞炎症因子的产生 ,另外在感染性休克、系统性红斑狼疮、炎症性肠病、肝损伤、肝癌等疾 …
阅读更多 »ECL发光液与亚麻子油和老龄公鸡睾酮相关基因和蛋白质表达研究
公鸡的繁殖性能在家禽生产中起着重要作用。男性生殖腺、雄激素和精子发生对男性维持正常的生殖功能至关重要。同时,年龄也是影响公鸡繁殖性能的重要因素。公鸡生育高峰在37周左右,50~55周左右下降。然而,商业饲养的公鸡往往被期望在更长的时间内保持较高的生育率。如何提高老龄公鸡的生育能力已成为亟待解决的重要问题。ω-3/n-3多不饱和脂肪酸(ω-3/n-3 pufa …
阅读更多 »细胞RNA转染注意事项
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享