英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
柯萨奇病毒是病毒性心肌炎，胰腺炎和无菌性脑膜炎的重要病原体，但没有具体的抗病毒治疗试剂的临床应用。RNA干扰技术可防止病毒感染。现分享一篇运用体内转染方法（Entranster-in vivo）研究治疗病毒性心肌炎的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制研究
丹参酮 IIA（Tanshinone IIA，Tan IIA）是一种从丹参干根中提取的生物活性物质，具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而，Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染（Entranster）的方法的文献，通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制，以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »动物体内转染实验给药剂量
动物体内转染试剂Entranster-in vivo进行实验时的推荐给药剂量和体积如下： 给药途径 …
阅读更多 »shRNA转染实验步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下shRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
阅读更多 »用AAV进行大脑转染的需要知道的问题
使用腺相关病毒（AAV）进行大脑转染是一种常用的基因传递方法，具有较高的特异性和安全性，但在实际操作中也会面临一些问题。以下是一些常见的问题及其解决方案： 转染效率问题： 选择合适的AAV血清型：不同的AAV血清型对不同类型的神经元和大脑区域具有不同的亲和力。选择合适的血清型可以显著提高转染效率。 病毒滴度：确保使用足够高滴度的AAV病毒，但要避免过高的滴度 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与CHL1与胶质瘤细胞研究
与L1CAM同源（接近同源的L1）的细胞粘附分子（CHL1）是细胞粘附分子L1（L1CAM）基因家族的一个成员。虽然其表达和功能已经在一些肿瘤的报道，在小鼠胶质瘤发生发展中的作用尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster）与CHL1与胶质瘤细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »如何达到更好的siRNA转染效率？
为了达到高的转染效率，在转染实验过程中，需要注意以下几点： 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与periaxin蛋白和施旺细胞研究
Periaxin蛋白是施旺细胞特异表达的一种蛋白，是其在周围神经髓鞘细胞骨架相关蛋白的筛选中首先被鉴定的。PRX蛋白在髓鞘形成和髓鞘的稳定起到了重要的作用，与肿瘤细胞侵袭转移密切相关。现分享一篇ECL发光液（enlight）与periaxin蛋白和施旺细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »siRNA细胞转染操作步骤
下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下siRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那 …
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