其它

细胞 RNA转染效率低，可能的原因： · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster-R4000，纳米材料，毒性低，效率高。 · 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态， …

一、miRNA的靶基因寻找 研究表明，一个基因可以受多个miRNA调控，而一种miRNA又可以参与调控多个靶基因，据预测，至少有30%的人类基因是miRNA的靶基因。这就足以显示出miRNA群体的重要性。而在人类疾病中多不同程度的表现出大量miRNA的上调和下调，这也足以显示miRNA在疾病发生过程中占据着非常重要的作用。而探讨miRNA的功能作用中最重要的 …

Western，也称Western blot、Western blotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的重要方法之一。可按照以下步骤操作。 1.收集蛋白样品(Protein sample preparation) 使用细胞裂解液，对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解。然后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。 电泳(Electrophoresis) ( …

基本方案1   木瓜蛋白酶水解IgG 成Fab 片段摸索性试验 此法适用于小鼠（任何亚类）、大鼠、人、山羊、绵羊、马、鸡、豚鼠和牛的 IgG 水解。 材料 保存于 PBS 中的 2mg/ml 纯化的lgG 木瓜蛋白酶 水解缓冲液：0. 02mol/L EDTA （ 二钠盐） / 0. 02mol/L 半胱氨酸／PBS （新鲜配制，冰上保存<10h) 溶 …

       目前，射频消融术（RFA）已成为治疗肝细胞癌（HCC）最广泛的方法。然而，越来越多的证据表明，RFA不足（IRFA）的发生可能导致患者体内残留HCC的快速发展，这可能极大地阻碍使用该技术的有效性和患者所获的益处。尽管已经做出了许多努力，但目前的研究文献综述还没有完全阐明导致IRFA后残余HCC快速进展的潜在机制。现分享一篇CCK8（engree …

喉癌是头颈部第二常见的恶性肿瘤，最常见的表现为鳞状细胞癌。这种疾病的发病率正在增加，然而，其发展的机制尚不完全清楚。因此，寻找新的喉鳞状细胞癌（LSCC）的诊断和治疗方法变得尤为重要。 现分享一篇RNA转染（Entranster）与siRNA靶向骨膜蛋白对人喉鳞状细胞癌抑制作用研究的文献，以供参考。

RNA转染效率低，可能的原因： · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。

材料 小鼠 HBSS 洗涤缓冲液 MACS 缓冲液 CD90 (Thyl. 2) 磁珠 RPMI-10 完全培养基 autoMACS 系统和分选柱 30μm 尼龙网或40μm 预分离滤膜 步骤 用2 只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞 。 将细胞在10ml HBSS 洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数 。 将细胞悬液在4°C，200g 离心10min。 …

      悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。      目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周 …

细胞转染效率受多种因素影响，主要因素有下面几个： 1．转染试剂       不同细胞系转染效率通常不同，但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然，最适合的是高效、低毒的转染试剂，如Entranster …