英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。脂质体法始于1987年，此法的出现使得转染效率、转染的稳定性和可重复性大大提高。阳离子脂质 …
阅读更多 »如何做好细胞电转染实验？
要想做好细胞的电转染实验，应注意以下几点： 1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 选择合适的细胞 用于电转的细胞 …
阅读更多 »CCK8与射频消融不足诱导的自噬和残余肝细胞癌快速进展研究
目前，射频消融术（RFA）已成为治疗肝细胞癌（HCC）最广泛的方法。然而，越来越多的证据表明，RFA不足（IRFA）的发生可能导致患者体内残留HCC的快速发展，这可能极大地阻碍使用该技术的有效性和患者所获的益处。尽管已经做出了许多努力，但目前的研究文献综述还没有完全阐明导致IRFA后残余HCC快速进展的潜在机制。现分享一篇CCK8（engree …
阅读更多 »电穿孔实验时的细胞密度是多少？
确定每种细胞类型的最佳细胞密度，以使电穿孔效率最大化。在含电转试剂的终体系中，电穿孔时的细胞密度一般在1-10×10^6细胞/ml范围内。对于悬浮细胞，最好是接近10×10^6细胞/ml的高细胞密度。对于贴壁细胞，建议的细胞密度为1-5×10^6细胞/ml。 如需了解更多关于电转染试剂的信息，请点击https://www.engreen.com …
阅读更多 »如何评估体内转染实验的效率？
运用体内试剂Entranster进行体内转染实验后，针对具体的组织器官，不同的注射方法会明显影响效果。比如，大脑神经细胞的体内转染，可以采用尾静脉注射和侧脑室注射，用侧脑室的方法就好得多。再比如，肺部的体内转染，用气管灌注就比用尾静脉注射的方法好得多。体内转染试剂和核酸的混合物与 …
阅读更多 »细胞转染效率不可重复原因
细胞转染效率不可重复原因： 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 细菌污染。可使用Entranster试剂，培养基可加抗生素，避免细胞污染。 细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 血清质量不稳定。用同一批号的血清。
阅读更多 »贴还是不贴——美国转基因标识风波
在美国，关于转基因食品的争论主要集中在是否要标识上。关于禁止各州强制标识转基因食品的法案，日前获得美国国会众议院通过，迈过了最终成为法律的关键第二步。然而，贴还是不贴，美国转基因标识风波仍未结束。 距离新法还有两步 日前，美国众议院以２７５票支持、１５０票反对通过《安全准确的食品标签法案》。根据这一法案，食品企业可不标注产品是否含有转基因成分，不遵循美国某些 …
阅读更多 »电转染实验需要注意的事项
1. 选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞的选择 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代 …
阅读更多 »细胞RNA转染的几点建议
为了做好RNA转染实验，提出几点关于细胞RNA转染实验的建议，供大家参考： 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »单克隆细胞培养上清的大规模制备
材料（其他材料见单克隆细胞培养上清的制备) 含有5~10mmol /L HEPES 的DMEM 完全培养基和DMEM- 10 完全培养基，pH 为7.2~7. 4 70% (V/ V) 乙醇 FBS 10% (m/V) 叠氮钠，可选的 850cm2 滚筒式培养瓶和滚简装置，37°C 250ml 塑料锥底离心管，无菌 离心机转子 0. 45μm 过滤装置，可选 …
阅读更多 »