DNA转染效率低的原因可从以下几方面找: 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策:用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策:对大多数细胞而言,质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3,一般要做优化实验,比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策:用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因
RNA转染效率低,可能的原因: 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster-R4000,纳米材料,毒性低,效率高。 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 检测时间有问题。适当调整检测时间。 RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。 &nbs …
阅读更多 »细胞转染效率低的原因有哪些?
细胞转染效率低的原因可从以下几方面找: 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策:用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策:对大多数细胞而言,质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3,一般要做优化实验,比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策:用好的质粒纯化试剂确保质粒 …
阅读更多 »CCK8与射频消融不足诱导的自噬和残余肝细胞癌快速进展研究
目前,射频消融术(RFA)已成为治疗肝细胞癌(HCC)最广泛的方法。然而,越来越多的证据表明,RFA不足(IRFA)的发生可能导致患者体内残留HCC的快速发展,这可能极大地阻碍使用该技术的有效性和患者所获的益处。尽管已经做出了许多努力,但目前的研究文献综述还没有完全阐明导致IRFA后残余HCC快速进展的潜在机制。现分享一篇CCK8(engree …
阅读更多 »关于英格恩,你了解多少?
细胞转染的实验方法有哪些?
1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。脂质体法始于1987年,此法的出现使得转染效率、转染的稳定性和可重复性大大提高。阳离子脂质 …
阅读更多 »BHK-21细胞的电转染条件是什么?
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时BHK-21细胞的电转染条件是:对于0.2 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为150V, 电容为950μF。对于0.4 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用量为5μg,电转液体积为25 …
阅读更多 »怎样有效提高细胞转染实验效率?
1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的纳米材料的Entranster试剂。 2.保持最佳的 …
阅读更多 »CCK8实验,如何设定空白对照组?
在不含细胞的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »使用AUTOMACS 系统进行B 细胞的自动分选
材料 小鼠 HBSS 洗涤缓冲液 MACS 缓冲液 CD45R(B220) 磁珠 RPMI-10 完全培养基 autoMACS 系统和分选柱 30μm 尼龙网(BD) 或40μm 预分离滤膜 步骤 用2 只小鼠的脾脏制备单细胞悬液并去除红细胞。 将细胞在10ml HBSS 洗涤缓冲液中混悬后用血细胞计数器计数 。 将细胞悬液在4℃,200g 离心10 min …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享