15周年庆,我们准备好了活动时间:2022.3.3—2022.3.15 —公司简介— 英格恩(EngreenBiosystem,Ltd.)是一家15年专注转染、微量蛋白检测、细胞培养和保存以及病毒感染等领域的专业公司。 2007年—2022年,公司先后推出DNA、小片断RNA转染试剂、动物体内转染试剂、高灵敏ECL发光液、病毒转染增强的试剂、电转染试剂等。 …
阅读更多 »免疫球蛋白G ( IgG) 片段的水解(三)
基本方案3 胃蛋白酶水解IgG 成F(ab’)2 片段的摸索性试验 在此试验中摸索在两个不同pH 下IgG 的水解情况,因为IgG 在低pH 下会水解成Fab 片段或更小的片段。胃蛋白酶的水解比木瓜蛋白酶更剧烈,因此推荐的酶/抗体 (E/A) 比例以不超过1: 20 为佳。 注意:从IgG2b水解不能得到F (ab’)2 片段,用胃 …
阅读更多 »ECL发光液使用过程中注意事项
1. 发光液不宜暴露于强光下时间过久,请避光保存,在暗室操作。 2. 为了得到最佳的曝光效果,优化一抗、二抗的稀释比例。 3. 请选择高质量保鲜膜。 4. 对于Enlight发光液,应避免使用NaN3 回收HRP 偶联的抗体,因为NaN3 能抑制HRP 的活性。
阅读更多 »小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤
小鼠大脑皮层神经元原代培养步骤: 1、 于无菌条件下切取鼠头并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠脑; 2、 预冷解剖液中分离去除软膜、血管、取大脑皮质漂洗,用眼科剪将皮质反复剪切成碎块; 3、 移入培养皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,37℃培养箱中消化30min; 4、&nb …
阅读更多 »siRNA细胞转染过程中应注意事项
为了达到高的转染效率,在转染实验过程中,需要注意以下几点: 1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致 …
阅读更多 »CCK8实验,应该每次做标准曲线吗?
建议每次做。虽然细胞是一样的,但是细胞的状态不一定一样,对于状态不一样的细胞,建议每次做标准曲线。如果试剂的批号不一样,灵敏度可能会有轻微的差异,对于不同的批号建议分别做标准曲线。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »CCK8实验,如何设定空白对照组?
在不含细胞的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »如何提高病毒感染效率20~50倍?
如何有效提高细胞转染实验效率?
1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、 …
阅读更多 »细胞siRNA转染实验步骤
下面以我们实验室所用的Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板) 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数 …
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英格恩生物技术博客 生物实验干货分享